無菌操作(zuo)：手術器械、容器等材(cai)料必須(xu)保(bao)持潔(jie)凈，避(bi)免污染。

一致(zhi)性：取樣人員盡(jin)可能(neng)使(shi)每組樣本在取材部位、組織塊(kuai)大(da)小、時間及處理條(tiao)件等方面保(bao)持一致(zhi)。

迅速性：保證質(zhi)量的(de)前提(ti)下在樣本(ben)采集(ji)、制備、凍(dong)存的(de)過(guo)程中提(ti)高速度，盡可能減少操(cao)作時間，確保樣本(ben)的(de)真實狀態(tai)。

除(chu)(chu)雜(za)：去(qu)除(chu)(chu)與(yu)實驗無(wu)關的雜(za)質(zhi)，如(ru)動(dong)物組織去(qu)血、植物組織去(qu)除(chu)(chu)泥(ni)土(tu)等污(wu)染物、菌(jun)體及細(xi)胞去(qu)除(chu)(chu)培(pei)養基等，推薦(jian)使用PBS緩沖液或者(zhe)生理(li)鹽水，吸水紙(zhi)吸干殘留(liu)液體。

全程低溫(wen)：樣本離體后，如有分(fen)離步驟可在4℃或冰(bing)上進(jin)行，分(fen)離好(hao)的樣本立即置(zhi)于液氮中(zhong)速凍，-80℃保存，干冰(bing)運輸。

分裝：提前規劃(hua)好實驗用(yong)量(liang)，避免反(fan)復凍融(rong)。

樣(yang)本足量：應檢(jian)測(ce)要(yao)(yao)求、生(sheng)物信息學分析要(yao)(yao)求及項目結果(guo)準確(que)性(xing)等(deng)，各個類型樣(yang)本的送(song)樣(yang)量及生(sheng)物學重復(fu)最好大于其(qi)對應的建議量。

標(biao)記(ji)清晰：確保樣(yang)品(pin)管(guan)質量(liang)可靠(kao)、避免標(biao)簽脫離或標(biao)記(ji)消融(rong)等，以(yi)免混淆樣(yang)本。

1.血漿

樣本收集步驟：

用(yong)抗凝管（代謝(xie)組學研究建議 EDTA，不(bu)推薦檸檬酸鈉(na)）采(cai)(cai)(cai)集血(xue)液，采(cai)(cai)(cai)血(xue)后(hou)立即輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)顛倒混勻(yun)采(cai)(cai)(cai)血(xue)管 5-10 次，以(yi)確保抗凝劑(ji)發揮作用(yong)；采(cai)(cai)(cai)血(xue)后(hou)需(xu)在(zai)30min內(nei)盡(jin)快(kuai)(kuai)離(li)(li)心分(fen)(fen)離(li)(li)出血(xue)漿(jiang)(jiang)（若不(bu)能盡(jin)快(kuai)(kuai)離(li)(li)心，采(cai)(cai)(cai)集的(de)(de)血(xue)液需(xu)放在(zai)4℃冰(bing)箱保存，并必須在(zai)4h內(nei)完成(cheng)離(li)(li)心及分(fen)(fen)裝），4℃條件下3000 rpm離(li)(li)心10 min-15 min，吸取適量上清液（即血(xue)漿(jiang)(jiang)）置于(yu)(yu)合適的(de)(de)已編號的(de)(de)EP管中(zhong)；如(ru)此重復分(fen)(fen)裝成(cheng)多管血(xue)清以(yi)避(bi)免反復凍融(rong)，盡(jin)快(kuai)(kuai)將(jiang)血(xue)漿(jiang)(jiang)保存于(yu)(yu)-80℃冰(bing)箱中(zhong)。

2.血清

樣本收集(ji)步驟：

用不含抗凝(ning)(ning)劑(ji)的(de)(de)樣(yang)本收集(ji)管(guan)采(cai)集(ji)血樣(yang)，或將(jiang)采(cai)好血樣(yang)的(de)(de)采(cai)血管(guan)室(shi)溫靜置(zhi)（注意：不能振搖采(cai)血管(guan)）；靜置(zhi)30 min-60 min使其凝(ning)(ning)結后(hou)，再(zai)將(jiang)采(cai)血管(guan)放入(ru)冷(leng)凍離(li)(li)心(xin)機(ji)內，4℃條(tiao)件下3000 rpm，離(li)(li)心(xin)10 min-15 min，吸取上(shang)清液(ye)（即血清）分(fen)裝于(yu)合適(shi)的(de)(de)已編號(hao)的(de)(de)EP管(guan)中；如此重復分(fen)裝成(cheng)多管(guan)血清以避免反復凍融，盡快將(jiang)血清保存(cun)于(yu)-80℃冰(bing)箱中。

注(zhu)意事項：

（1）血漿(jiang)參考產率≈50%，例如1mL全(quan)血大約(yue)能得0.5mL血漿(jiang)。

（2）血(xue)清參(can)考(kao)產(chan)率(lv)≈30%~50%，例如1mL全血(xue)大約能得0.3~0.5mL血(xue)清。

（3）采集到的(de)血清為黃(huang)(huang)色(se)透明(ming)液體、血漿為淡黃(huang)(huang)色(se)半透明(ming)液體，如果發現(xian)樣本中是(shi)紅色(se)，說明(ming)已經發生了溶血現(xian)象，樣本需(xu)重新制備。

1.尿液

樣(yang)本收集步驟：

取晨起中段尿（臨床）或晨間 1h 尿（動物），3000rpm，4°C 離(li)心(xin) 10min，將(jiang)澄清尿液(ye)分(fen)裝到離(li)心(xin)管(guan)中，做好標記后，液(ye)氮(dan)速凍15min，于-80℃下保存。

注意事項：

（1）動物1小時尿量(liang)不夠，可分(fen)多次收(shou)集，如果需(xu)要(yao)收(shou)取24h尿液，請使用帶有低(di)溫裝置的代謝籠收(shou)集，并及(ji)時凍存樣本。

（2）不推薦使(shi)用抗菌劑，使(shi)用無(wu)菌的(de)采集(ji)容(rong)器(qi)，確(que)保樣本(ben)不受外(wai)部環境的(de)污染。

（3）受試(shi)者應避免在采樣前夜(ye)食用可(ke)能干擾代(dai)謝分析的(de)食物或飲料（如酒(jiu)精、咖啡(fei)等）。

2.唾液

樣本收(shou)集步驟：

唾(tuo)液(ye)樣(yang)本需在靜息狀(zhuang)態下進(jin)行收集(ji)，在收集(ji)唾(tuo)液(ye)樣(yang)本前(qian)，請用飲用水(shui)將口腔內的雜物洗漱干凈。確(que)認唾(tuo)液(ye)采(cai)集(ji)管的外包裝完好(hao)；檢查唾(tuo)液(ye)采(cai)集(ji)管中(zhong)的保存(cun)液(ye)，確(que)認無漏液(ye)，確(que)認保存(cun)液(ye)中(zhong)沒有沉淀析(xi)出(chu)，低溫(wen)凍存(cun)寄送(song)。

注(zhu)意事項：

（1）收集前(qian)至少2小時(shi)避免(mian)禁食禁煙禁水等(deng)（盡量不要接(jie)受外(wai)界刺激(ji)，建(jian)議晨起(qi)收集）。

（2）為保證(zheng)收集的唾(tuo)液中富有足夠量(liang)的細胞，建(jian)議漱口時間為收集唾(tuo)液樣本的前30分鐘。

3.痰液

樣本收集步(bu)驟(zou)：

采樣(yang)前(qian)(qian)12h禁食，清晨(chen)痰(tan)(tan)量(liang)多，可作為取樣(yang)時間；采集前(qian)(qian)應進行漱口，以(yi)除去口腔中細菌；深吸氣(qi)后用(yong)力咳(ke)出1－2口痰(tan)(tan)于廣口無菌瓶中，痰(tan)(tan)量(liang)極少可用(yong)45℃ 10%氯(lv)化鈉溶液(ye)霧化吸入(ru)導(dao)痰(tan)(tan)；添(tian)加質量(liang)體積為0.5/1000（w/v）的疊氮(dan)化鈉，用(yong)注射器將(jiang)痰(tan)(tan)液(ye)來回抽提并打出，使得痰(tan)(tan)液(ye)混勻；-80℃凍存，足(zu)量(liang)干冰寄送(song)。

適用于腦、心臟、肝臟、腎臟、肌肉、皮膚、血(xue)管、軟骨等。

樣本收集步驟：

根(gen)據具體實(shi)驗設計(ji)準確(que)切除所需組(zu)(zu)織，迅速剝去非必需的脂肪和(he)結(jie)締組(zu)(zu)織等(deng)；用預冷的PBS緩沖(chong)液或生理鹽水(shui)清洗干(gan)凈，以去除血液殘(can)留和(he)污物；用干(gan)凈的無(wu)塵吸(xi)水(shui)紙吸(xi)干(gan)水(shui)分(fen)，根(gen)據實(shi)驗設計(ji)將(jiang)組(zu)(zu)織分(fen)裝待(dai)用；管子上做好標記后(hou)放入液氮中(zhong)冷凍處理至少 15min，-80℃凍存，足量干(gan)冰寄(ji)送。

1.人糞便(bian)

樣本收(shou)集步(bu)驟：

采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)為(wei)早上和中(zhong)午較(jiao)好，采(cai)集前(qian)先(xian)排(pai)尿，將糞便于(yu)清(qing)潔干燥的(de)容器中(zhong)，采(cai)用無菌小勺、手(shou)術(shu)刀(dao)或糞便取(qu)(qu)樣(yang)器等工具，挖取(qu)(qu)排(pai)泄中(zhong)后部的(de)內側糞便，混(hun)合均勻后分裝(zhuang)為(wei)多份(fen)。稱重記錄，采(cai)集量需達到樣(yang)本(ben)量要(yao)求。可每例樣(yang)本(ben)準備多管(guan)備份(fen)，液氮速凍后-80℃保存。

2.小鼠(shu)糞便

樣本收集步驟：

待測的小鼠排(pai)便后(hou)(hou)，立即用滅菌的鑷子(zi)夾取(qu)；收(shou)集小鼠糞便6-8粒，轉入凍存管(guan)；為避免反復凍融，樣(yang)(yang)本可用無(wu)菌棒混合均勻(yun)后(hou)(hou)進行多管(guan)分裝(zhuang)；-80℃冰箱凍存。寄樣(yang)(yang)需足量干(gan)冰。

注意(yi)事項(xiang)：

（1）糞便(bian)樣本(ben)盡量(liang)不要接觸到尿液，避(bi)免(mian)多(duo)樣本(ben)交(jiao)叉污染(ran)，且(qie)尿液中(zhong)含有大量(liang)尿素，會干擾后續糞便(bian)樣本(ben)檢測。

（2）人糞便樣本提(ti)供(gong)者在(zai)取樣的(de)近三個(ge)月內不可接受抗生素治療(liao)。

3.腸道內(nei)容物

樣本(ben)收集(ji)步驟：

使用無(wu)(wu)菌(jun)的解剖刀(dao)，盡(jin)量(liang)在無(wu)(wu)菌(jun)狀態(tai)下(xia)取出(chu)整個腸道，將(jiang)實驗所(suo)需的腸段的內(nei)容(rong)物切下(xia)，將(jiang)內(nei)容(rong)物取出(chu)放置在無(wu)(wu)菌(jun)離心(xin)管中，建議(yi)分裝保存(cun)，便于后續(xu)實驗需求，低溫保存(cun)運輸；若是無(wu)(wu)法立即(ji)抽提，建議(yi)將(jiang)樣本先置于液氮中冷凍4小(xiao)時以上，保證冷凍充(chong)分再(zai)轉移(yi)到-80℃保存(cun)。

樣本收集步驟：

取樣區(qu)域一般(ban)是根據實(shi)驗(yan)設(she)計(ji)進(jin)(jin)行(xing)選擇，建議選取具(ju)(ju)有(you)代表性(xing)的(de)(de)土壤(rang)；采(cai)樣時使用(yong)的(de)(de)所有(you)工(gong)(gong)具(ju)(ju)、采(cai)集袋或其他物品均(jun)要使用(yong)已(yi)滅(mie)菌(jun)的(de)(de)；若(ruo)野外沒(mei)有(you)合適的(de)(de)條件進(jin)(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun)處理(li)，可以使用(yong)采(cai)集的(de)(de)土壤(rang)對取樣工(gong)(gong)具(ju)(ju)進(jin)(jin)行(xing)擦拭，盡量去除(chu)干(gan)擾(rao)；采(cai)集時一般(ban)選取5-10 cm處土壤(rang)，去除(chu)雜(za)質，將一定量的(de)(de)土壤(rang)進(jin)(jin)行(xing)分(fen)裝(zhuang)標記，密(mi)封(feng)后(hou)立即(ji)低(di)溫(wen)保(bao)存。

1.貼壁細胞

樣本收集步驟：

從培(pei)養箱(xiang)中(zhong)取(qu)出用(yong)(yong)于計(ji)數(shu)的(de)細(xi)胞樣本，去(qu)除(chu)(chu)培(pei)養基(ji)后(hou)(hou)用(yong)(yong)PBS洗一遍(bian)，去(qu)除(chu)(chu)PBS，之后(hou)(hou)加胰(yi)蛋白酶消(xiao)化后(hou)(hou)計(ji)數(shu)，得到細(xi)胞數(shu)目，接(jie)下來開始處理(li)正式實(shi)驗用(yong)(yong)的(de)樣本；去(qu)除(chu)(chu)培(pei)養基(ji)，加PBS洗2-3遍(bian)后(hou)(hou)徹底去(qu)除(chu)(chu)PBS。

方(fang)法(fa)1：加入(ru)1 mL預冷(leng)的(de)PBS溶液，快(kuai)速(su)用細胞(bao)(bao)刮將(jiang)細胞(bao)(bao)刮下(xia)來，收集到離(li)心管(guan)(guan)中，低速(su)離(li)心1 min，棄(qi)去上清，收集細胞(bao)(bao)沉淀于2 mL進口離(li)心管(guan)(guan)中，液氮(dan)速(su)凍15 min，-80℃保存，足量干冰運輸。

方法(fa)2：加入1 mL預冷的LC-MS級別的甲醇(chun)/乙腈/水（2:2:1，v/v/v，代謝組）快速(su)用細胞刮將細胞刮下來，收集到進口離心管中，加封口膜(mo)密封好，送樣前(qian)置(zhi)于-80°C保存；足量干冰運輸。

注意事項：

對(dui)于貼(tie)壁細胞的(de)代謝(xie)研(yan)究(jiu)，不建議使用胰(yi)蛋白酶消化。

2.懸浮(fu)細胞

樣本收(shou)集步驟(zou)：

離心去除(chu)(chu)培養基，PBS洗2-3遍后離心去除(chu)(chu)PBS，液氮速凍后置于-80°C暫存。

1.葉片、莖(jing)、花

樣本收(shou)集步驟(zou)：

取整片葉(xie)片/一段莖/一朵花，用錫箔紙(zhi)包裹并標(biao)(biao)記后(hou)，迅(xun)速(su)放(fang)入(ru)液氮中冷凍處理至少15min。取出后(hou)迅(xun)速(su)放(fang)入(ru)自封袋中(每組一袋)，在自封袋中放(fang)入(ru)標(biao)(biao)簽(qian)紙(zhi)注明樣(yang)本(ben)信息。迅(xun)速(su)放(fang)入(ru)-80°C凍存，干冰寄送。

注意事項：

（1）采集(ji)葉片樣本時(shi)，最好在中午光照好的(de)時(shi)間收集(ji)。

（2）要根據實驗設計，采(cai)集樣本(ben)時保持樣本(ben)一致性，尤其是同一組樣本(ben)（如顏(yan)色(se)、衰(shuai)老程(cheng)度、葉脈占比、光照、位置等）。

2.根

樣本(ben)收集(ji)步驟：

取整株植(zhi)物的根部，迅(xun)速用1×PBS漂洗(xi)掉根上(shang)的泥(ni)土。根據(ju)具體實驗設計取植(zhi)株根特定的部位，樣本裝入離(li)心管(guan)中。標(biao)號后迅(xun)速放入液(ye)氮(dan)中冷凍處理(li)至(zhi)少(shao)15 min。-80 °C凍存，干冰寄送(song)。

注意事項：

（1）PBS漂洗要快。

（2）由于根部(bu)組織特(te)別脆弱，被擠(ji)壓后會變(bian)成漿(jiang)糊狀，所(suo)以推(tui)薦保存至離心管中，而不是(shi)錫箔紙包裹。

（3）植(zhi)物各類組織樣本建議都使用超純水進(jin)行漂(piao)洗(xi)完之后，再研(yan)磨分裝凍存(cun)，防止因(yin)種(zhong)植(zhi)過程中施(shi)加的一些肥料、農(nong)藥等含有表面活(huo)性劑或其他(ta)雜(za)質，對后續實驗造成影響。

3.果實、種子

樣本(ben)收集(ji)步驟(zou)：

（1）對于含多(duo)汁(zhi)、塊(kuai)頭較大的(de)果實（番茄、西瓜、蘋果等）需要先用(yong)鋒利的(de)刀分(fen)割成“均(jun)勻”合適的(de)小塊(kuai)（≈200 mg/樣本）分(fen)裝至2 mL離心管中，標號后迅速放入液氮中冷(leng)凍處理。

（2）對于細(xi)小的顆粒種子(zi)（擬南芥種子(zi)、谷物種子(zi)等），可以先(xian)將同一組的植(zhi)株(zhu)種子(zi)混勻后(hou)再(zai)分裝(zhuang)（≈200 mg/樣本）至離心管中，標號后(hou)迅速(su)放入(ru)液氮(dan)中冷凍處理。

（3）對于要(yao)求(qiu)對整(zheng)個(ge)果實進行提(ti)取的（整(zheng)粒葡萄等），需要(yao)把(ba)果實裝在50 mL離(li)心管中/自封(feng)袋中，標(biao)號后迅速(su)放(fang)入(ru)液氮中冷凍處(chu)理。

注意事(shi)項(xiang)：

（1）對多(duo)汁的(de)(de)果(guo)實(shi)進(jin)行取樣很難保持均一(yi)性（如番茄、皮、果(guo)肉、果(guo)瓤、籽的(de)(de)占比），建(jian)議將(jiang)整個(ge)果(guo)實(shi)進(jin)行研磨、凍干，對粉(fen)末進(jin)行稱(cheng)重分(fen)裝。

（2）不(bu)推(tui)薦用錫箔紙包裹。

1.細菌/酵母(mu)菌體

樣本(ben)收(shou)集步驟：

取(qu)(qu)(qu)生長到(dao)一(yi)(yi)定程度的菌(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)，測OD值(zhi)，用(yong)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)將各個(ge)樣本(ben)的OD值(zhi)調到(dao)一(yi)(yi)樣，保證取(qu)(qu)(qu)樣的菌(jun)(jun)(jun)(jun)體(ti)(ti)數目均一(yi)(yi)。取(qu)(qu)(qu)1個(ge)15 mL離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)管，稱(cheng)(cheng)量(liang)并記(ji)錄(lu)(lu)離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)管的重量(liang)a。取(qu)(qu)(qu)5 mL的等量(liang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)加到(dao)上(shang)述(shu)離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)管中，離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)后棄培(pei)(pei)養基(ji)(ji)，再用(yong)生理鹽水或者(zhe)PBS洗(xi)2-3遍，洗(xi)去殘留培(pei)(pei)養基(ji)(ji)，離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)去上(shang)清(qing)，保留菌(jun)(jun)(jun)(jun)體(ti)(ti)沉淀，用(yong)槍(qiang)頭徹底去除(chu)液(ye)體(ti)(ti)，再次稱(cheng)(cheng)量(liang)并記(ji)錄(lu)(lu)重量(liang)b，用(yong)b-a得到(dao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)體(ti)(ti)濕重，看是否達到(dao)送樣量(liang)要(yao)求(qiu)， 如果不夠的話繼續取(qu)(qu)(qu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)直到(dao)達到(dao)送樣量(liang)要(yao)求(qiu)。記(ji)錄(lu)(lu)達到(dao)送樣量(liang)要(yao)求(qiu)所需要(yao)的菌(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)體(ti)(ti)積(ji)。對剩下所有菌(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)樣本(ben)都取(qu)(qu)(qu)上(shang)述(shu)記(ji)錄(lu)(lu)的體(ti)(ti)積(ji)，離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)去除(chu)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)，生理鹽水或者(zhe)PBS洗(xi)2-3遍，用(yong)槍(qiang)頭徹底去除(chu)上(shang)清(qing)。菌(jun)(jun)(jun)(jun)體(ti)(ti)沉淀連同離(li)心(xin)(xin)(xin)(xin)(xin)管一(yi)(yi)起放進液(ye)氮中速凍，之后置于-80℃冰箱中保存。

2.固體(ti)真菌

樣(yang)本收集步驟：

稱(cheng)量固(gu)體真(zhen)菌樣本于(yu)離心(xin)管中(zhong)，達到送樣量要(yao)求(qiu)。菌體連同(tong)離心(xin)管一起放進液氮中(zhong)速凍，之后置(zhi)于(yu)-80℃冰箱(xiang)中(zhong)保存。

代謝(xie)(xie)組學樣(yang)品(pin)應盡量避免反復(fu)凍融，這是因(yin)為(wei)環境溫度及變化均會對生物體內的(de)小(xiao)分子(zi)代謝(xie)(xie)物產(chan)生影響(xiang)[1]。因(yin)此，我們建議在存儲前有計劃地將樣(yang)品(pin)提前分裝好，盡量避免反復(fu)凍融。

樣品長期存(cun)儲(chu)于(yu)液氮中是最理想的存(cun)儲(chu)方(fang)式，但是需要不斷補充液氮，操(cao)作成本高。實驗室中最常見的存(cun)儲(chu)方(fang)式是-20℃和(he)-80℃冰箱。研究表明(ming)(ming)，經(jing)過長達6個月(yue)的存(cun)儲(chu)以后，除部分代謝物（如蛋氨酸、B族維(wei)生(sheng)(sheng)素、DHA和(he)EPA）在-20℃下存(cun)儲(chu)3個月(yue)以上會發生(sheng)(sheng)顯著(zhu)降解(jie)，-20℃和(he)-80℃存(cun)儲(chu)的樣品整體(ti)代謝輪廓沒有明(ming)(ming)顯差異，且和(he)收集(ji)當(dang)天較為類似[2-4]。因此(ci)，推薦(jian)將(jiang)樣品存(cun)儲(chu)于(yu)-80℃冰箱，并盡快(kuai)送檢。

全血的穩定性(xing)差(cha)，存在異(yi)(yi)質(zhi)性(xing)，所以一般檢(jian)測中避免使用全血而(er)選用血漿(jiang)或血清(qing)。血清(qing)和(he)血漿(jiang)樣本都被廣泛(fan)用于代謝組學研究(jiu)(jiu)，整體而(er)言，血清(qing)和(he)血漿(jiang)的代謝物(wu)種(zhong)類(lei)差(cha)異(yi)(yi)不大，但是多數代謝物(wu)在兩種(zhong)樣本中濃度(du)差(cha)異(yi)(yi)較大[5-6]。因此，對于同一個研究(jiu)(jiu)項目而(er)言，我們選擇同一類(lei)型的血液(ye)樣本（血清(qing)或血漿(jiang)）。

溶血可(ke)以(yi)(yi)引起苯丙氨酸、鳥(niao)氨酸、檸檬(meng)酸、琥珀酸、磷脂以(yi)(yi)及鞘脂等多種代謝物的改變(bian)[8]。為了避免溶血，在制備(bei)血清血漿樣(yang)本(ben)時(shi)應注意離心速(su)度和(he)時(shi)間，避免轉速(su)過(guo)(guo)高(gao)；在采集血液過(guo)(guo)程(cheng)中避免劇烈(lie)晃動；每管加入蛋(dan)白酶抑(yi)制劑可(ke)以(yi)(yi)有(you)效地保護(hu)蛋(dan)白質完整性、提高(gao)實驗數據(ju)的準確性和(he)可(ke)靠性，并且有(you)助于(yu)延長樣(yang)品(pin)的保存時(shi)間。

常見(jian)的(de)抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)有(you)三種：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸、肝素(su)鹽。其中(zhong)，檸(ning)檬(meng)酸和EDTA是(shi)通過鈣離子鰲合作(zuo)(zuo)用(yong)而(er)(er)抗(kang)凝(ning)(ning)，而(er)(er)肝素(su)是(shi)通過激活抗(kang)凝(ning)(ning)血(xue)酶，抑制凝(ning)(ning)血(xue)因(yin)子而(er)(er)抗(kang)凝(ning)(ning)。檸(ning)檬(meng)酸是(shi)TCA 循環中(zhong)的(de)重要(yao)物(wu)質，使用(yong)檸(ning)檬(meng)酸鈉抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)會引入(ru)外源污染；EDTA在NMR上會產生很(hen)強的(de)噪音信(xin)號[9]。而(er)(er)肝素(su)鹽抗(kang)凝(ning)(ning)管會在液質上產生嚴重的(de)干擾信(xin)號[5,8]。若選擇質譜作(zuo)(zuo)為代謝組(zu)學檢(jian)測平(ping)臺，我們推薦EDTA作(zuo)(zuo)為血(xue)漿抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)。

由(you)于尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)中(zhong)細菌(jun)生長迅速，有些(xie)研究會(hui)在(zai)尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)中(zhong)添加如硼(peng)酸和疊氮化鈉等抑(yi)(yi)菌(jun)劑保護尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)樣本不(bu)(bu)被污染。但這些(xie)外來化學試劑的添加不(bu)(bu)可避(bi)免(mian)地會(hui)對尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)中(zhong)的代謝物產生不(bu)(bu)利影響。已有研究表明，尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)樣品在(zai)低(di)于-25℃條件(jian)下(xia)儲存時，添加抑(yi)(yi)菌(jun)劑和不(bu)(bu)加抑(yi)(yi)菌(jun)劑，樣品的代謝輪廓沒有差異(yi)[10-11]。因(yin)此(ci)，我們不(bu)(bu)建議(yi)在(zai)尿(niao)(niao)(niao)(niao)液(ye)(ye)(ye)樣品中(zhong)添加如疊氮化鈉等抑(yi)(yi)菌(jun)劑。

有影(ying)響(xiang)，且在(zai)(zai)不(bu)同(tong)個(ge)(ge)體之間(jian)差(cha)異和(he)影(ying)響(xiang)不(bu)一致。因此，建議對于單(dan)個(ge)(ge)樣(yang)本(ben)量大(da)的糞便樣(yang)本(ben)，在(zai)(zai)低溫儲存(cun)前用無菌棒混勻取(qu)適合的量儲存(cun)。而單(dan)個(ge)(ge)樣(yang)本(ben)量少的樣(yang)本(ben)，可(ke)以整個(ge)(ge)儲存(cun)，后(hou)續檢測時再混勻。

胰蛋(dan)白酶(mei)會造(zao)成細(xi)胞膜發生(sheng)透化(hua)(hua)，促使代謝(xie)物(wu)滲(shen)漏出細(xi)胞，流(liu)向(xiang)細(xi)胞外部，導致細(xi)胞內代謝(xie)物(wu)耗盡(jin)的“代謝(xie)物(wu)滲(shen)漏”現(xian)象。同時，胰蛋(dan)白酶(mei)消化(hua)(hua)還會刺激脂肪酸和能量(liang)利用相關的代謝(xie)物(wu)豐度信號劇增，造(zao)成胰蛋(dan)白酶(mei)化(hua)(hua)過程中出現(xian)代謝(xie)物(wu)的假(jia)陽(yang)性差異(yi)。可采用細(xi)胞刮棒的物(wu)理方式消化(hua)(hua)和解離(li)細(xi)胞，盡(jin)量(liang)減(jian)少(shao)胞內代謝(xie)物(wu)的損失，獲取更多的代謝(xie)物(wu)信息。