熒光定量(liang)PCR(Real-Time PCR)技術,即是在PCR反應體系中加入熒光物質,利用熒光信號積累實時(shi)監測(ce)整個PCR進(jin)程,對未(wei)知模板進(jin)行定量(liang)分析的方法。
一、服(fu)務流程(cheng)
l 根據基因序(xu)列設計特異性的(de)引物和(he)熒光探針
l 從(cong)細胞或特(te)定組織中提取總RNA
l 制作(zuo)標準(zhun)曲(qu)線:使用設計合成(cheng)的(de)(de)(de)引物(wu),以客戶提(ti)供的(de)(de)(de)Total RNA樣品為模(mo)板,進行(xing)(xing)Real Time PCR反應,確認引物(wu)模(mo)板的(de)(de)(de)反應性能。然后將模(mo)板進行(xing)(xing)5個濃度梯度稀釋(shi),制作(zuo)標準(zhun)曲(qu)線,以供進一步定量(liang)分析使用
l Real Time PCR反應及定量(liang)(liang)分析(xi):對(dui)客(ke)戶提供的RNA Sample,進(jin)行Real Time RT-PCR反應,并(bing)進(jin)行定量(liang)(liang)分析(xi)。用相(xiang)(xiang)對(dui)定量(liang)(liang)方法進(jin)行定量(liang)(liang)分析(xi)時,要對(dui)管(guan)家基因(yin)等參比基因(yin)進(jin)行同(tong)樣操作,用所得(de)到的值進(jin)行RNA量(liang)(liang)的校正(zheng),最后(hou)求得(de)目的基因(yin)的相(xiang)(xiang)對(dui)表達量(liang)(liang)
l 提(ti)供實(shi)(shi)驗(yan)報告:包(bao)括詳(xiang)細的(de)實(shi)(shi)驗(yan)方法及實(shi)(shi)時(shi)熒光定量PCR實(shi)(shi)驗(yan)結果(guo)的(de)相關圖表
二、實驗(yan)周期(qi)及價格
服務項目 | 實驗周期 | 價格 |
總RNA提取 | 2~3個工作日 | 100元/樣品 |
內參和目的基因的Real Time PCR反應 | 15個工作日 | 100/樣品/基因 |
結果分析及實驗報告 | 2~3個工作日 | 詢價 |
三、交貨(huo)內容
完整的(de)實(shi)驗報告,包括實(shi)驗過程、所用儀器試(shi)劑、擴增曲線(xian)、標準(zhun)曲線(xian)和相關(guan)分(fen)析數據
四、服務(wu)說明
l 請提(ti)供盡量多的實驗材料:動(dong)物(wu)細(xi)胞數為106以(yi)上,動(dong)物(wu)組織為100 mg以(yi)上
l 客戶須在實(shi)驗開始前保證(zheng)其(qi)細胞或組織中有目的基因的表達,并提供目的基因的相關信息(xi)(基因名(ming)稱(cheng)、序列等信息(xi))
l 客(ke)戶(hu)應對(dui)所提(ti)(ti)供的(de)材料及(ji)信息負責(ze),如因客(ke)戶(hu)提(ti)(ti)供的(de)材料及(ji)信息不準確而引(yin)起的(de)實驗延誤或經濟損失由客(ke)戶(hu)承擔
l PCR所需引(yin)(yin)物(wu)/探(tan)針(zhen)(zhen)(如(ru)果用探(tan)針(zhen)(zhen)法),可以(yi)由您(nin)自(zi)己提供,也可以(yi)委(wei)托本公司設計合成(cheng)(費(fei)用另(ling)計)。如(ru)果由您(nin)自(zi)己提供,是PAGE純(chun)化的(de)干粉(fen),本公司不(bu)接受已(yi)溶解(jie)的(de)引(yin)(yin)物(wu)/探(tan)針(zhen)(zhen)。