Shotgun蛋白質質譜鑒定

蛋白質(zhi)全譜分(fen)析(xi)(xi)也可稱為(wei)質(zhi)譜shotgun分(fen)析(xi)(xi)，指的是(shi)組(zu)分(fen)分(fen)析(xi)(xi)，研究對象(xiang)是(shi)完整(zheng)的組(zu)織、體液(ye)或其提(ti)

取物，其目的(de)在(zai)于鑒定出盡可能多的(de)肽(tai)和(he)蛋白質分子。

技術原理(li)：

蛋白(bai)質(zhi)膠條/混合溶液鑒(jian)定(ding)

利(li)用(yong)LC-ESI-MS/MS蛋白鑒(jian)定技術對膠條樣本（即SDS-PAGE樣本）、IP、co-IP、Pull-down等純(chun)化溶液

等中等復雜樣本進(jin)行蛋(dan)白鑒定(ding)。

技術(shu)原理：

電噴霧(wu)(wu)（ESI）技(ji)術是將待測(ce)分(fen)子(zi)溶解在(zai)溶劑(ji)中通(tong)過 HPLC 分(fen)離，以液(ye)相方式通(tong)過毛細管達到(dao)噴霧(wu)(wu)口(kou)，在(zai)噴霧(wu)(wu)口(kou)高壓(ya)電場(chang)作(zuo)用下形(xing)成帶電荷(he)的(de)微(wei)(wei)滴，隨(sui)著微(wei)(wei)滴中的(de)揮(hui)發(fa)性溶劑(ji)蒸(zheng)發(fa)，微(wei)(wei)滴表(biao)面(mian)的(de)電荷(he)體密度隨(sui)半徑減少而增加，達到(dao)某(mou)一(yi)臨界點時，樣(yang)品以離子(zi)化的(de)方式從液(ye)滴表(biao)面(mian)蒸(zheng)發(fa)，進入質量分(fen)析器。

蛋白質(zhi)膠(jiao)點(dian)鑒(jian)定

利用MALDI-TOF/TOF蛋(dan)(dan)白鑒定技術(shu)對考/銀染的2D或DIGE膠(jiao)點(dian)樣本(ben)或者較(jiao)純(chun)的蛋(dan)(dan)白樣本(ben)進(jin)行蛋(dan)(dan)白鑒定。

技(ji)術原理：

MALDI-TOF/TOF（基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)(zhu)激(ji)光解析電(dian)離(li)(li)(li)飛(fei)行(xing)時(shi)(shi)間(jian)(jian)質(zhi)(zhi)(zhi)譜）儀器(qi)主要由兩(liang)部分(fen)組成：基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)(zhu)激(ji)光解析電(dian)離(li)(li)(li)離(li)(li)(li)子(zi)源(yuan)（MALDI）和飛(fei)行(xing)時(shi)(shi)間(jian)(jian)質(zhi)(zhi)(zhi)量分(fen)析器(qi)（TOF）。基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)(zhu)激(ji)光解析（MALDI）技術是(shi)將樣品(pin)(pin)均勻包(bao)埋在(zai)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)中，基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)吸收激(ji)光提供的能(neng)量而蒸發，攜帶部分(fen)樣品(pin)(pin)分(fen)子(zi)進入氣相(xiang)，并(bing)將一部分(fen)能(neng)量傳遞(di)給樣品(pin)(pin)分(fen)子(zi)使其離(li)(li)(li)子(zi)化。TOF 的原理是(shi)離(li)(li)(li)子(zi)在(zai)電(dian)場作用下加速飛(fei)過飛(fei)行(xing)管道，根(gen)據到達檢(jian)測(ce)(ce)(ce)器(qi)的飛(fei)行(xing)時(shi)(shi)間(jian)(jian)不(bu)同而被檢(jian)測(ce)(ce)(ce)，即測(ce)(ce)(ce)定離(li)(li)(li)子(zi)的質(zhi)(zhi)(zhi)荷比（M/Z）與離(li)(li)(li)子(zi)的飛(fei)行(xing)時(shi)(shi)間(jian)(jian)成正比，從而檢(jian)測(ce)(ce)(ce)離(li)(li)(li)子(zi)。