一.DNA克隆簡介

DNA克隆是(shi)基(ji)因工程研究中基(ji)本的(de)操作之一。簡單地講，就是(shi)將外源基(ji)因與克隆載體進(jin)行體外連接，然后再轉化到宿(su)主菌(jun)中進(jin)行克隆、篩選，以此(ci)獲(huo)得質粒重(zhong)組體。 

二.服務要求

1. 提供(gong)外源DNA的(de)來(lai)源及背景資料(liao)。DNA來(lai)源包括：PCR擴增產物，RT-PCR擴增產物，從其他質粒(li)上酶(mei)切得到(dao)的(de)DNA片段(duan)等。 

2. 如DNA為(wei)PCR產物，請(qing)提(ti)供DNA片(pian)段的(de)電泳(yong)照片(pian)，并請(qing)標明Marker及其濃度。  

3. 注明克隆使用的酶切(qie)位點。 

4. 如果為商品(pin)化載體，請提供(gong)生(sheng)產廠(chang)家及標準(zhun)名稱(cheng)，如果所提供(gong)載體是您構(gou)建(jian)的，請注明多克(ke)隆位(wei)點、抗性(xing)、分子量(liang)等資料。 

5. 實驗中使用(yong)氨(an)芐、青霉(mei)(mei)素(su)、卡那霉(mei)(mei)素(su)、四(si)環素(su)以外的抗生素(su)時，抗生素(su)需您提供。 

6. 您(nin)自(zi)己提供的(de)引物如果為干品(pin)，請(qing)標明具(ju)體的(de)OD數(shu)，如果為液體狀態，請(qing)標明具(ju)體濃度(du)。 

三.操作程序

1. 通(tong)過代理商(shang)或(huo)直(zhi)接(jie)和公司(si)聯系，同時提供詳細的(de)背景資料，實驗要求(qiu)等(deng)。代理商(shang)或(huo)公司(si)經過研討后將和您(nin)取得聯系，協商(shang)確(que)定(ding)實驗方案，并告知您(nin)具體的(de)服(fu)務價格，我們將簽訂合同，在收到您(nin)試驗材料后，立即(ji)開始實驗。 

2. 如果(guo)您需要我們進行(xing)PCR擴增(zeng)時，我們會采(cai)用DNA聚合酶進行(xing)PCR反應。

3. 如果克隆(long)后的(de)質粒需要測序反應，請將標準參考(kao)序列的(de)電子版資料(liao)提供給我(wo)們。 

4. 在完成(cheng)DNA克(ke)隆和測序(xu)等工作后，我們將為您提(ti)供一套完整(zheng)的實(shi)(shi)驗(yan)結(jie)果，其中包括：實(shi)(shi)驗(yan)操作說明、引物、克(ke)隆構建的質(zhi)粒(li)及(ji)含(han)該質(zhi)粒(li)的菌(jun)體（穿刺(ci)菌(jun)）、測序(xu)結(jie)果堿基序(xu)列圖和測序(xu)彩色峰形圖。 

5. 一般(ban)情況(kuang)下普通載體的克隆需10天左右時間。

四.收費標準

1. 普通載體（如(ru)pUC系(xi)(xi)列、pBluescript ll系(xi)(xi)列、T載體系(xi)(xi)列、pGEM系(xi)(xi)列等）與其(qi)他(ta)特殊載體（如(ru)pET系(xi)(xi)列、pGEX系(xi)(xi)列、pLNCX 系(xi)(xi)列、pQE系(xi)(xi)列、pBR系(xi)(xi)列等）在(zai)克隆(long)(long)時難(nan)易(yi)程度相(xiang)差很大，不(bu)同(tong)的DNA片(pian)段的克隆(long)(long)情況也各不(bu)相(xiang)同(tong)，因此(ci)DNA片(pian)段的克隆(long)(long)服務收(shou)費(fei)標(biao)準不(bu)一(yi)樣。一(yi)般來說，單就克隆(long)(long)操作這一(yi)步驟而言的收(shou)費(fei)標(biao)準在(zai)600～1500之間(jian)，具體情況請詢(xun)價。  

2. 多表達框、多拷貝數質粒構建過程相對復雜，具體(ti)收費標準(zhun)請與公司基(ji)因(yin)工程師(shi)直接談(tan)。

五.克隆服務的種類

1、PCR產物(wu)的TA克隆(long)。 

2、PCR產物(wu)克隆到非T載體。

3、注明克(ke)隆使用的酶切位點以及是否需(xu)要(yao)平(ping)端連(lian)接(jie)等。

4、各種載體中元件的修改。

5、原核、真核表達(da)載體(ti)的構建。