Shotgun蛋白質(zhi)質(zhi)譜鑒(jian)定

蛋白質全譜(pu)(pu)分(fen)析(xi)也可稱為質譜(pu)(pu)shotgun分(fen)析(xi)，指的是組分(fen)分(fen)析(xi)，研究對(dui)象是完整(zheng)的組織、體(ti)液(ye)或其提

取物，其(qi)目的(de)在于(yu)鑒定出(chu)盡可能多的(de)肽(tai)和蛋白質(zhi)分子。

技術(shu)原理：

蛋白質膠(jiao)條/混(hun)合溶液鑒(jian)定

利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條(tiao)樣本（即SDS-PAGE樣本）、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液

等(deng)中(zhong)等(deng)復雜樣本(ben)進行蛋白(bai)鑒定。

技術原理：

電噴(pen)(pen)霧(wu)（ESI）技(ji)術是(shi)將待測分(fen)子溶(rong)解在溶(rong)劑中通(tong)(tong)過(guo)(guo) HPLC 分(fen)離(li)，以液相方式通(tong)(tong)過(guo)(guo)毛細(xi)管(guan)達(da)到噴(pen)(pen)霧(wu)口，在噴(pen)(pen)霧(wu)口高壓電場作用下(xia)形成帶電荷(he)的(de)微滴，隨著微滴中的(de)揮(hui)發(fa)性溶(rong)劑蒸(zheng)發(fa)，微滴表(biao)面的(de)電荷(he)體密度隨半徑減(jian)少(shao)而增加，達(da)到某一臨(lin)界點時，樣品以離(li)子化的(de)方式從液滴表(biao)面蒸(zheng)發(fa)，進入質量分(fen)析器。

蛋白質膠點鑒(jian)定

利用MALDI-TOF/TOF蛋(dan)白鑒定(ding)技術對考/銀(yin)染的2D或(huo)DIGE膠點(dian)樣(yang)本或(huo)者較純的蛋(dan)白樣(yang)本進(jin)行蛋(dan)白鑒定(ding)。

技術(shu)原理：

MALDI-TOF/TOF（基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)激光(guang)解析(xi)電離飛(fei)行(xing)時(shi)間(jian)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)譜）儀器(qi)主(zhu)要由(you)兩(liang)部分組成(cheng)：基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)激光(guang)解析(xi)電離離子(zi)(zi)源(yuan)（MALDI）和飛(fei)行(xing)時(shi)間(jian)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)量分析(xi)器(qi)（TOF）。基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)輔助(zhu)激光(guang)解析(xi)（MALDI）技(ji)術是(shi)將樣(yang)品均勻包埋在(zai)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)中，基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)吸收激光(guang)提(ti)供的(de)能量而蒸發，攜(xie)帶部分樣(yang)品分子(zi)(zi)進入氣相，并將一部分能量傳遞給樣(yang)品分子(zi)(zi)使其離子(zi)(zi)化。TOF 的(de)原理是(shi)離子(zi)(zi)在(zai)電場作(zuo)用下(xia)加速飛(fei)過飛(fei)行(xing)管道，根據到達(da)檢(jian)測(ce)器(qi)的(de)飛(fei)行(xing)時(shi)間(jian)不同而被檢(jian)測(ce)，即測(ce)定離子(zi)(zi)的(de)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)荷比(bi)（M/Z）與(yu)離子(zi)(zi)的(de)飛(fei)行(xing)時(shi)間(jian)成(cheng)正(zheng)比(bi)，從而檢(jian)測(ce)離子(zi)(zi)。