熒光定量(liang)PCR(Real-Time PCR)技術,即是在PCR反應體系中加入熒光物(wu)質,利(li)用熒光信號(hao)積累實時監測整個PCR進程,對未知模板(ban)進行定量(liang)分析的方(fang)法。
一、服務流程
l 根(gen)據(ju)基因(yin)序列(lie)設計特異性的引物和熒光(guang)探針(zhen)
l 從細(xi)胞或特(te)定(ding)組織中提取(qu)總RNA
l 制作(zuo)標(biao)準曲線(xian):使用(yong)設計合成(cheng)的引(yin)物,以(yi)客戶提供(gong)的Total RNA樣品(pin)為模板,進行(xing)(xing)Real Time PCR反應,確認引(yin)物模板的反應性能。然后(hou)將模板進行(xing)(xing)5個濃度梯度稀釋,制作(zuo)標(biao)準曲線(xian),以(yi)供(gong)進一步定量分析使用(yong)
l Real Time PCR反(fan)應及定(ding)量(liang)(liang)分(fen)(fen)析:對(dui)(dui)客戶提(ti)供的RNA Sample,進(jin)行Real Time RT-PCR反(fan)應,并(bing)進(jin)行定(ding)量(liang)(liang)分(fen)(fen)析。用相(xiang)對(dui)(dui)定(ding)量(liang)(liang)方法進(jin)行定(ding)量(liang)(liang)分(fen)(fen)析時,要(yao)對(dui)(dui)管家基因(yin)等參比基因(yin)進(jin)行同樣操作,用所得(de)到的值(zhi)進(jin)行RNA量(liang)(liang)的校正,最后求得(de)目(mu)的基因(yin)的相(xiang)對(dui)(dui)表(biao)達(da)量(liang)(liang)
l 提供實(shi)驗報(bao)告:包括詳(xiang)細的(de)實(shi)驗方法及(ji)實(shi)時熒光定量(liang)PCR實(shi)驗結果的(de)相關圖表
二(er)、實驗周(zhou)期及價格
服務項目 | 實驗周期 | 價格 |
總RNA提取 | 2~3個工作日 | 100元/樣品 |
內參和目的基因的Real Time PCR反應 | 15個工作日 | 100/樣品/基因 |
結果分析及實驗報告 | 2~3個工作日 | 詢價 |
三、交貨內(nei)容(rong)
完(wan)整的(de)實驗報告,包(bao)括實驗過程、所用儀(yi)器試劑(ji)、擴增(zeng)曲(qu)線、標(biao)準曲(qu)線和相關分析數(shu)據
四、服務(wu)說(shuo)明(ming)
l 請提(ti)供盡量多的實(shi)驗(yan)材料:動物細胞數(shu)為(wei)106以(yi)上(shang),動物組織為(wei)100 mg以(yi)上(shang)
l 客戶(hu)須在實(shi)驗開始前保證其細(xi)胞或(huo)組織(zhi)中有目的(de)基(ji)因(yin)的(de)表達,并提供(gong)目的(de)基(ji)因(yin)的(de)相關信(xin)(xin)息(基(ji)因(yin)名稱(cheng)、序列等(deng)信(xin)(xin)息)
l 客戶(hu)(hu)應對所提供的材(cai)料(liao)及信(xin)息(xi)負責,如因客戶(hu)(hu)提供的材(cai)料(liao)及信(xin)息(xi)不(bu)準確而(er)引起的實驗延誤或經濟(ji)損失由(you)客戶(hu)(hu)承擔
l PCR所需(xu)引物(wu)/探(tan)針(如果(guo)用探(tan)針法),可(ke)以由您自己提(ti)供,也可(ke)以委托本公(gong)司(si)設計(ji)合成(費用另計(ji))。如果(guo)由您自己提(ti)供,是PAGE純化的干粉(fen),本公(gong)司(si)不接受已(yi)溶解的引物(wu)/探(tan)針。