2024-10-07
做(zuo)質譜檢測時，選(xuan)擇血清、血漿、PBMC還是全(quan)血？ 你還覺得血清+血漿=全(quan)血？ 接下來讓我們一起揭開血液樣本在質(zhi)譜檢測領域的神秘面紗。
血液組成 血(xue)(xue)液(ye)是一種特殊的體液(ye)，它有四個主要(yao)成分(fen)：血(xue)(xue)漿、紅(hong)細(xi)胞(bao)、白細(xi)胞(bao)和血(xue)(xue)小板(ban)。 血(xue)(xue)漿(jiang)：血(xue)(xue)液(ye)(ye)中的(de)(de)液(ye)(ye)體(ti)成分稱為血(xue)(xue)漿(jiang)，是水、糖、脂肪、蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)和鹽(yan)的(de)(de)混(hun)合物(wu)，約占(zhan)血(xue)(xue)液(ye)(ye)體(ti)積的(de)(de)55%。血(xue)(xue)漿(jiang)的(de)(de)主(zhu)要工作是將血(xue)(xue)細胞(bao)與營養物(wu)質(zhi)(zhi)、廢物(wu)、抗體(ti)、凝血(xue)(xue)蛋(dan)白(bai)、激素等化(hua)學信使以及有助于維持(chi)身體(ti)體(ti)液(ye)(ye)平衡的(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)一起輸送到全身。 紅(hong)(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)：紅(hong)(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)以其(qi)鮮(xian)紅(hong)(hong)色而(er)聞名，是血(xue)(xue)液中最豐富的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，約(yue)占其(qi)體積的 40% 至 45%。紅(hong)(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)含有一(yi)種叫做血(xue)(xue)紅(hong)(hong)蛋白的特殊蛋白質，它(ta)有助于將(jiang)氧氣從肺(fei)部(bu)輸送(song)到身體的其(qi)他部(bu)位。由紅(hong)(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)組成的全血(xue)(xue)體積的百分比(bi)(bi)稱為(wei)血(xue)(xue)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)比(bi)(bi)容，是衡(heng)量紅(hong)(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)水平的常用指標。 白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)：白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)主(zhu)要起免(mian)疫作用，但它們的(de)(de)(de)數(shu)量比紅(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)少得多，約占血液的(de)(de)(de) 1%。最常見的(de)(de)(de)白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)類(lei)型(xing)是(shi)(shi)中(zhong)性粒細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，約占白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)的(de)(de)(de) 55% 至 70%。每(mei)個中(zhong)性粒細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)壽命(ming)不到一天，因此骨髓必(bi)須不斷產(chan)生(sheng)新的(de)(de)(de)中(zhong)性粒細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，以對機體(ti)進行保(bao)護。白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)另一種主(zhu)要類(lei)型(xing)是(shi)(shi)淋巴(ba)(ba)(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，其(qi)(qi)主(zhu)要類(lei)群就是(shi)(shi)大名鼎鼎的(de)(de)(de)T淋巴(ba)(ba)(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和B淋巴(ba)(ba)(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)。T淋巴(ba)(ba)(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)有(you)助于(yu)調節其(qi)(qi)他免(mian)疫細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)功能(neng)，直接攻(gong)擊各種感染細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和腫瘤。B淋巴(ba)(ba)(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)則產(chan)生(sheng)抗(kang)(kang)體(ti)來對抗(kang)(kang)細(xi)(xi)(xi)菌、病(bing)毒和其(qi)(qi)他外(wai)來物質的(de)(de)(de)侵襲。 血(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)：與紅細胞和白(bai)細胞不同，血(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)是從骨髓(sui)巨核細胞脫(tuo)落下來(lai)的胞質小(xiao)(xiao)塊(kuai)，并(bing)非嚴格意義上(shang)的細胞。血(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)會導致(zhi)纖維蛋白(bai)凝(ning)塊(kuai)的形成，從而幫(bang)助血(xue)液凝(ning)固。 流經靜脈、動脈和(he)毛細血(xue)(xue)(xue)管的(de)(de)(de)血(xue)(xue)(xue)液被稱(cheng)為(wei)全血(xue)(xue)(xue)，約占總體重的(de)(de)(de)7%到8%。因(yin)為(wei)全血(xue)(xue)(xue)的(de)(de)(de)穩(wen)定(ding)性(xing)差，存在異質性(xing)，且(qie)全血(xue)(xue)(xue)中包含血(xue)(xue)(xue)細胞，而血(xue)(xue)(xue)細胞中的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白會改變(bian)血(xue)(xue)(xue)清和(he)血(xue)(xue)(xue)漿(jiang)的(de)(de)(de)成分，從而掩蓋其他(ta)低豐度蛋(dan)(dan)白和(he)代(dai)謝物的(de)(de)(de)信號。所以一般(ban)檢(jian)測中避免使用(yong)(yong)全血(xue)(xue)(xue)而選用(yong)(yong)血(xue)(xue)(xue)漿(jiang)或(huo)血(xue)(xue)(xue)清進行(xing)質譜組學的(de)(de)(de)檢(jian)測。
血清和血漿的區別 血(xue)清和血(xue)漿(jiang)都來自(zi)去(qu)除(chu)細(xi)胞后殘留(liu)的(de)血(xue)液(ye)中的(de)液(ye)體(ti)(ti)部分，血(xue)清是(shi)血(xue)液(ye)凝結后殘留(liu)的(de)液(ye)體(ti)(ti)，而血(xue)漿(jiang)是(shi)通過添加抗凝劑阻(zu)止凝血(xue)時殘留(liu)的(de)液(ye)體(ti)(ti)。所以血(xue)漿(jiang)與血(xue)清的(de)主(zhu)要區別是(shi)血(xue)清中不(bu)含纖維蛋白原等凝血(xue)因子。 雖(sui)然血(xue)清(qing)和血(xue)漿(jiang)中大部分物質都是(shi)相同的，但也(ye)存在(zai)一些區別(bie)： 序號(hao) 特征 血清(qing) 血(xue)漿 1 定義 血液在自然凝固(gu)后分離出(chu)的透明黃色液體 血液細(xi)胞懸浮在其中的黃色微(wei)堿性液體 2 凝血因(yin)子 含有不帶凝血(xue)因子的(de)血(xue)液水性液體 含有(you)凝血因子的血液液體(ti) 3 組成 血(xue)清含有(you)蛋白(bai)質(zhi)、電解質(zhi)、抗體、抗原和激素 含有(you)所有(you)懸浮的血細胞及蛋(dan)白(bai)質、鹽類、脂質、葡(pu)萄糖 4 水(shui)分含量 血清含有90%的(de)水 血(xue)漿含有92-95%的(de)水 5 成分 血清含有白(bai)蛋白(bai)和(he)球蛋白(bai)等(deng)蛋白(bai)質 血漿含(han)有凝血因子和水分 6 纖(xian)維蛋白原 不含纖維蛋(dan)白原 含有(you)纖維蛋白原 7 細胞排列 細胞(bao)通常通過凝塊形式(shi)聚集(ji)在一起(qi) 細胞不聚集在(zai)一起，懸浮(fu)在(zai)血漿中 8 分離方(fang)法 通過凝(ning)血后離心獲得(de) 在凝血前通過(guo)離(li)心(xin)獲(huo)得 9 抗凝劑 分離(li)血清不(bu)需要抗凝劑 分離血漿需要抗(kang)凝劑 10 分離 血清的分離需要較(jiao)高的專業(ye)技能、成本較(jiao)高且耗時 血漿的(de)分離相對簡單且成本較低 11 體(ti)積 與血(xue)漿相比(bi)體積較少(shao) 占血液總量的55% 12 密(mi)度 血(xue)清(qing)的密度為1.024g/ml 血漿(jiang)的密度為(wei)1.025g/ml 13 儲存 血(xue)清可以在(zai)2-6攝氏度下保存數天 冷(leng)凍血漿可以保存長達一年 14 變色 血清放置后(hou)不會變色 血漿放置后容易變色 15 重要性 血清(qing)是電解質的主要來源 運輸排(pai)泄代(dai)謝物和血(xue)液中的物質(zhi)，維(wei)持血(xue)壓并調節體溫 16 用途 人類(lei)血清通常用(yong)于診斷測試，其他動物血清用(yong)于抗蛇毒(du)(du)、抗毒(du)(du)素(su)和疫(yi)苗(miao) 也可用(yong)于治療目的 血(xue)漿用于(yu)缺(que)乏(fa)血(xue)細(xi)胞(bao)的患者 或輸給患有血(xue)友病、休克、燒傷和其他凝血(xue)問題的患者
血清和(he)血漿的制備 血清的制備過程： 1.使用真(zhen)空(kong)采血(xue)管收集血(xue)液（不(bu)含(han)抗凝劑，紅蓋）。 2.輕(qing)輕(qing)地上下顛(dian)倒混勻(yun) 5-6 次(ci)。 3.4℃，靜置 15-30 min，3000g 離心 10min。 4.用移液器將上層淡黃色(se)血清轉移到離心管中(zhong)，加入蛋白酶抑制劑（一般按照 1∶50 添(tian) 加；具體視實際說明方(fang)法使用），混勻，瞬時離心。取上清，液氮速凍，-80℃保存； 血漿的(de)制(zhi)備過程： 1.使用 EDTA 抗凝(ning)劑（空采血管帽蓋為(wei)紫色）的血常規管采集血液（不能使用含(han)有肝素 抗凝劑的采血管）。 2.輕(qing)輕(qing)地上下(xia)顛倒混勻 8-10 次；室溫靜止 30 分鐘，1300g-2000g，離(li)心 10min。 3.用(yong)移液器將(jiang)血漿轉移到離心管中(zhong)，加入蛋白酶抑制劑，混(hun)勻，瞬時離心。 4.液氮(dan)速凍，-80℃短期保存，干冰寄送。
選(xuan)擇(ze)血(xue)(xue)清還是血(xue)(xue)漿？ 血清和(he)血漿的(de)主(zhu)要區別(bie)在上面章節已經列出，這里我(wo)們主(zhu)要探討血清血漿在質譜組血檢(jian)測時(shi)的(de)優(you)劣(lie)。 ?血漿的優勢： 節省時間：血漿樣本可以在采集后立即離心，而血清則需要等待血液凝固。 得(de)率(lv)更高：離(li)心后的血(xue)漿體積比血(xue)清多(duo)，血(xue)漿樣本得(de)率(lv)比血(xue)清多(duo)大約15%-20%。 預(yu)防溶血(xue)：血(xue)漿(jiang)樣本的溶血(xue)風(feng)險較低。 ?血(xue)清的優(you)勢： 減(jian)少細(xi)(xi)(xi)胞(bao)污染：血(xue)清在離心后幾(ji)乎不含細(xi)(xi)(xi)胞(bao)成分(fen)，而血(xue)漿中可能仍有白細(xi)(xi)(xi)胞(bao)、紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)、血(xue)小板和非特異性細(xi)(xi)(xi)胞(bao)碎片(pian)。 更(geng)好的(de)穩定(ding)性：血清中的(de)某些指標（如葡萄(tao)糖）在室(shi)溫(wen)下穩定(ding)性更(geng)好，這對于(yu)需要(yao)(yao)長時間(jian)儲(chu)存的(de)樣(yang)本尤(you)為(wei)重要(yao)(yao)。 減少抗凝劑污(wu)染：血(xue)清(qing)不需要抗凝劑，避免了抗凝劑可(ke)能引起的干擾。 ?蛋白(bai)組檢測： 血(xue)漿因為(wei)使用了抗凝(ning)劑，血(xue)漿中保留(liu)了凝(ning)血(xue)因子，其組成成分有(you)可能會(hui)受(shou)到抗凝(ning)劑的干擾。 血(xue)(xue)清會缺失部分(fen)凝(ning)血(xue)(xue)因(yin)子，且(qie)在自然凝(ning)結過程中部分(fen)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)會與纖維(wei)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)原結合沉降，導致這類蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)含量(liang)稍(shao)低于血(xue)(xue)漿。 ?代謝組檢測： 血清(qing)制備過程中一(yi)些較不穩定的代謝(xie)(xie)物可能會發生酶轉化(hua)和降解，如黃嘌呤、牛磺酸、谷氨酰胺、含硫(liu)氨基酸、蘇糖酸、麥芽糖、甘油(you)三酯等代謝(xie)(xie)物，關(guan)注此(ci)類(lei)代謝(xie)(xie)物可優(you)先選(xuan)擇血漿樣本。 血(xue)(xue)栓(shuan)素B2只存在血(xue)(xue)清中，且血(xue)(xue)清中的精氨(an)酸，絲氨(an)酸、苯丙(bing)氨(an)酸等(deng)氨(an)基(ji)酸以(yi)及磷脂的含(han)量都(dou)比血(xue)(xue)漿相對(dui)要(yao)高，故關(guan)注此類代謝物可選擇(ze)血(xue)(xue)清樣本。 整體而言，血清和血漿在質(zhi)譜組學研究中差別(bie)不大，選用血清還是血漿來(lai)做樣本檢測并沒有唯一(yi)的定論，研究時還需根(gen)據具體實驗目的來(lai)確定。
