2024-12-10
中(zhong)藥(yao)含(han)藥(yao)血(xue)(xue)清(qing)是指將中(zhong)藥(yao)煎煮后的(de)(de)藥(yao)液或提取(qu)物(wu)(wu)給(gei)予實驗(yan)動(dong)物(wu)(wu)（如小鼠、大鼠等）口服(fu)或通過(guo)其他方式(shi)攝(she)入后，從這(zhe)些動(dong)物(wu)(wu)體內(nei)采集的(de)(de)血(xue)(xue)液經過(guo)離心(xin)處(chu)理得到的(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)。這(zhe)種血(xue)(xue)清(qing)包(bao)含(han)了(le)藥(yao)物(wu)(wu)成分及其在體內(nei)的(de)(de)代(dai)謝產物(wu)(wu)，能夠較好地(di)模擬(ni)人(ren)體服(fu)用中(zhong)藥(yao)后的(de)(de)情況，因(yin)此被廣(guang)泛應用于中(zhong)藥(yao)藥(yao)理學研究(jiu)中(zhong)。
使用中藥含藥血清進行(xing)研(yan)究具(ju)有以下幾個(ge)優點：
1.更(geng)接近實際(ji)：相(xiang)比直接(jie)使用中藥提取物或者單體(ti)化(hua)合物，含藥血清更能反映藥物進(jin)入(ru)生物體(ti)后的真實狀態，包括藥物的吸收、分(fen)布、代謝及(ji)排泄過程。
2.減少干擾因素(su)：可(ke)以避免一些非活性成分對實驗結果的(de)(de)影(ying)響，因為(wei)只有(you)那些能被機體吸(xi)收并進入血(xue)液循(xun)環(huan)的(de)(de)有(you)效(xiao)成分才(cai)會(hui)存在于血(xue)清當(dang)中。
3.提(ti)高(gao)效率：對于某(mou)些(xie)難以溶(rong)于水(shui)或其他溶(rong)劑(ji)中(zhong)的(de)中(zhong)藥成分而言，采用(yong)含藥血清的(de)方法可以直接獲得其活性形式，從而簡化了實驗步驟。
4.便于開展細胞實驗(yan)：含藥(yao)(yao)血清可以直接加(jia)入(ru)到細胞(bao)培養體系(xi)中，用于觀察藥(yao)(yao)物對特定(ding)類型(xing)細胞(bao)的(de)作(zuo)用效果(guo)，為深入(ru)探討中藥(yao)(yao)作(zuo)用機制提供了便利(li)條件。
需(xu)(xu)要(yao)(yao)注意的(de)(de)是，在準備和(he)使用(yong)中(zhong)藥(yao)含藥(yao)血清時也存在一定的(de)(de)局限性，比如不(bu)同(tong)批次間(jian)(jian)可能(neng)存在差異、個體間(jian)(jian)反(fan)應可能(neng)有(you)所不(bu)同(tong)等問題(ti)。此外(wai)，如何準確控制給藥(yao)劑量以及選擇(ze)合適的(de)(de)采血時間(jian)(jian)點也是需(xu)(xu)要(yao)(yao)仔細考慮的(de)(de)問題(ti)。
那么如何(he)確定給藥劑量和采(cai)血時(shi)間呢？
制備含藥(yao)血清的實驗動物給藥(yao)劑量
如果將含(han)藥血清視為(wei)一種藥物，其給(gei)藥劑(ji)量(liang)(liang)主要取決于兩個(ge)方面：一是動(dong)物的(de)給(gei)藥量(liang)(liang)，二是培(pei)養體(ti)系(xi)或反(fan)應體(ti)系(xi)中含(han)藥血清的(de)濃度。動(dong)物給(gei)藥量(liang)(liang)的(de)換算(suan)公(gong)式為(wei)：動(dong)物給(gei)藥量(liang)(liang)換算(suan)公(gong)式為(wei)給(gei)藥劑(ji)量(liang)(liang)＝人臨(lin)床(chuang)用量(liang)(liang)×動(dong)物等效劑(ji)量(liang)(liang)比(bi)值×培(pei)養液(ye)中血清稀(xi)釋度。如果是進行入血成(cheng)分(fen)分(fen)析，可以適當(dang)提高給(gei)藥劑(ji)量(liang)(liang)（通常(chang)是臨(lin)床(chuang)劑(ji)量(liang)(liang)的(de)5-10倍）。
給藥和采血時間
目前(qian)有幾種(zhong)常用的給藥方案：
7～10天給藥法：每天一(yi)次(ci)，連續給(gei)藥7～10天。
3次給藥法：連續(xu)3次給藥，第1次和(he)第2次間(jian)隔(ge)20小(xiao)時，第2次和(he)第3次間(jian)隔(ge)4小(xiao)時。
2次(ci)給藥法：第1次給藥(yao)后2小時，再以相同劑量(liang)重復(fu)給藥(yao)1次。
采(cai)血(xue)時(shi)間通常在(zai)末次(ci)給藥后(hou)的(de)0.5～3小(xiao)(xiao)時(shi)內(nei)，一般不(bu)超過6小(xiao)(xiao)時(shi)。采(cai)血(xue)時(shi)間過早，部分藥物組分可能尚未被吸收(shou)入(ru)血(xue)；采(cai)血(xue)時(shi)間過長，部分藥物組分可能在(zai)體內(nei)發(fa)生轉化或被排泄掉(diao)。理想(xiang)的(de)采(cai)血(xue)時(shi)間應選擇在(zai)藥物達到穩態血(xue)藥濃度期間。
含藥血清的制備以及有效成分的鑒定
血清的處理
大多(duo)數(shu)研(yan)(yan)究(jiu)人(ren)員采(cai)(cai)用56℃水浴(yu)加熱(re)30分鐘的(de)(de)方法(fa)來滅活(huo)含藥(yao)血(xue)清，這樣(yang)可以去除(chu)血(xue)清中的(de)(de)補(bu)體等干擾實驗的(de)(de)活(huo)性(xing)成(cheng)分。也有(you)研(yan)(yan)究(jiu)人(ren)員通過乙醇、丙酮等有(you)機試(shi)劑處理含藥(yao)血(xue)清，使蛋白質變性(xing)，從而去除(chu)血(xue)清中的(de)(de)酶、激素等成(cheng)分，保(bao)留藥(yao)物本(ben)身(shen)的(de)(de)作用。此外要注意采(cai)(cai)集的(de)(de)血(xue)清如果(guo)后續進行代謝組鑒定(ding)有(you)效成(cheng)分，為了(le)保(bao)證鑒定(ding)效果(guo)，血(xue)清不要溶血(xue)。
在中(zhong)醫藥(yao)的(de)(de)研(yan)(yan)究中(zhong)由于(yu)中(zhong)藥(yao)的(de)(de)成(cheng)(cheng)分(fen)復雜。一般SCI發表(biao)都會要求對中(zhong)藥(yao)進(jin)行成(cheng)(cheng)分(fen)表(biao)征，或(huo)做中(zhong)藥(yao)原液(ye)、或(huo)檢(jian)測入血成(cheng)(cheng)分(fen)，以確定(ding)可能(neng)發揮藥(yao)效的(de)(de)物質基礎。因此，確定(ding)中(zhong)藥(yao)入血有效成(cheng)(cheng)分(fen)成(cheng)(cheng)為了很多中(zhong)醫藥(yao)研(yan)(yan)究者重點的(de)(de)實驗步驟(zou)。那么我們用什么檢(jian)測方(fang)法才能(neng)鑒(jian)定(ding)中(zhong)藥(yao)含(han)藥(yao)血清的(de)(de)有效成(cheng)(cheng)分(fen)呢？這(zhe)里小派向(xiang)大家推薦派森諾中(zhong)藥(yao)入血分(fen)析。
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任何(he)藥(yao)(yao)(yao)(yao)物(wu)都是(shi)(shi)通(tong)過(guo)與人(ren)身的相(xiang)互作(zuo)用來(lai)發揮療效的。中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)所(suo)含成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)及其(qi)(qi)復雜，要想將(jiang)其(qi)(qi)成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)逐 一(yi)地(di)弄清(qing)(qing)楚(chu)，再(zai)進行藥(yao)(yao)(yao)(yao)效、藥(yao)(yao)(yao)(yao)理學研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)，幾乎是(shi)(shi)不(bu)可(ke)(ke)能(neng)的。此時,就應該換一(yi)個角度(du)來(lai)思考(kao)這(zhe)個問題(ti)，即首先考(kao)慮(lv)人(ren)體對藥(yao)(yao)(yao)(yao)物(wu)的作(zuo)用。中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)口服(fu)給藥(yao)(yao)(yao)(yao)后，經(jing)(jing)消化(hua)道、腸道菌群作(zuo)用，生成(cheng)(cheng)(cheng)一(yi)種由(you)中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)固有(you)成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)及其(qi)(qi)代 謝產物(wu)組(zu)成(cheng)(cheng)(cheng)的混合物(wu)，有(you)的直(zhi)接被排泄，有(you)的被選擇性(xing)吸(xi)收，經(jing)(jing)肝酶(mei)作(zuo)用進入血(xue)(xue)液(ye)(ye)，通(tong)過(guo)血(xue)(xue)液(ye)(ye)運輸到各個 器官組(zu)織或靶點(dian)(dian)，并(bing)在達到一(yi)定的血(xue)(xue)藥(yao)(yao)(yao)(yao)濃(nong)度(du)時才(cai)能(neng)真(zhen)正(zheng)起效。可(ke)(ke)見，不(bu)論中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)含有(you)多少成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)，只有(you)進入血(xue)(xue) 液(ye)(ye)的成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)才(cai)有(you)可(ke)(ke)能(neng)成(cheng)(cheng)(cheng)為(wei)有(you)效成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)（外(wai)用藥(yao)(yao)(yao)(yao)及直(zhi)接刺激胃腸道藥(yao)(yao)(yao)(yao)物(wu)除外(wai)）。基于絕大多數藥(yao)(yao)(yao)(yao)物(wu)只有(you)經(jing)(jing)過(guo)血(xue)(xue)液(ye)(ye) 循環才(cai)能(neng)起作(zuo)用的觀點(dian)(dian)，血(xue)(xue)清(qing)(qing)藥(yao)(yao)(yao)(yao)物(wu)化(hua)學已成(cheng)(cheng)(cheng)為(wei)近年來(lai)用來(lai)研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)藥(yao)(yao)(yao)(yao)效物(wu)質(zhi)(zhi)基礎較為(wei)科學并(bing)且發展較為(wei)迅 速的方法之一(yi)，其(qi)(qi)主要是(shi)(shi)研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)(zhong)的化(hua)學物(wu)質(zhi)(zhi)，觀測血(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)(zhong)外(wai)源性(xing)活性(xing)物(wu)質(zhi)(zhi)及其(qi)(qi)作(zuo)用和代謝規(gui)律，在中(zhong)(zhong)藥(yao)(yao)(yao)(yao)及復方藥(yao)(yao)(yao)(yao)效物(wu)質(zhi)(zhi)基礎研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)方面受到了廣(guang)泛(fan)的認(ren)可(ke)(ke)。
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