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生物科學入門指南:如何挑選合適的抗體

2025-03-17

Highlights

1、在生物科學實驗中,挑選合適抗體需結合實(shi)驗類型、樣本(ben)特性(xing)及抗體性(xing)能綜合考量

2、關鍵篩選指(zhi)標包(bao)括:明確實驗(yan)(yan)應用(yong)場(chang)景(jing)(查看(kan)廠家標(biao)注(zhu)的(de)已(yi)驗(yan)(yan)證(zheng)應用(yong))、宿主(zhu)物種匹配性(避免二抗(kang)交叉反應)、驗(yan)(yan)證(zheng)數據(ju)完整(zheng)性(含(han)實驗(yan)(yan)結果圖、文獻引用(yong))、單(dan)克隆(long)(long) / 多(duo)克隆(long)(long)選擇(定量實驗(yan)(yan)選單(dan)抗(kang),低(di)豐度(du)(du)蛋白選多(duo)抗(kang))、品牌知名度(du)(du)及性價(jia)比(bi);

3、國(guo)(guo)際品牌如 Abcam(抗(kang)體庫全)、CST(磷酸(suan)化抗(kang)體權威)、Thermo Fisher(一站(zhan)式服務),國(guo)(guo)產品牌如博奧(ao)森、三鷹生物(性價比高)可作為(wei)參考。

在生(sheng)物(wu)科學實(shi)驗中,抗體(ti)(ti)是探索蛋白質功能、定位及相互作用(yong)的“黃金鑰匙”。然而,面(mian)對市場(chang)上琳瑯滿目(mu)的抗體(ti)(ti)產品(pin)和廠(chang)家,科研(yan)新手(shou)常(chang)常(chang)感到無(wu)從(cong)下手(shou)。本文將從(cong)抗體(ti)(ti)基礎知識(shi)、應用(yong)場(chang)景解析、關鍵篩選指標和廠(chang)家推薦四部分(fen)入手(shou),助你高效避(bi)坑(keng),選對抗體(ti)(ti)!

一、抗體是(shi)什么(me)?

抗體(ti)(Antibody),又稱免(mian)疫球(qiu)蛋白(Immunoglobulin, Ig),是免(mian)疫系(xi)統用(yong)來(lai)(lai)識別和(he)中和(he)外來(lai)(lai)病原(yuan)體(ti)的(de)關(guan)鍵分子。其基(ji)本結構(gou)為“Y”型,由兩條(tiao)相同的(de)重鏈(lian)和(he)兩條(tiao)相同的(de)輕鏈(lian)組成,頂端為可變區(Fab段),負責(ze)特異(yi)性結合(he)抗原(yuan);底(di)部為恒定區(Fc段),可與免(mian)疫細(xi)胞或(huo)補體(ti)結合(he)觸發(fa)下游反(fan)應。

根(gen)據(ju)用途和來源(yuan),抗體主要分為兩類:

單(dan)克隆抗體:由單(dan)一B細胞克(ke)隆產(chan)生(sheng),特異(yi)性強、批次(ci)穩(wen)定性高(gao),適合定量實驗(如ELISA、流式細胞術)。

多(duo)克隆抗體:由多個B細胞克隆混(hun)合產生,可識(shi)別抗(kang)原的多個表(biao)位,靈敏度高,適合檢測低豐度蛋(dan)白(如WB、IHC)。

二、抗體的核心(xin)應用場(chang)景(jing)與(yu)技(ji)術要求

不(bu)同實(shi)驗對(dui)抗體的特性需求差異(yi)顯著,以下是常見(jian)應(ying)用場景解(jie)析(xi):

三、挑(tiao)選(xuan)抗體的4大關鍵因素(su)

3.1、明確實驗(yan)應用(yong)場景

不同(tong)實驗(yan)對(dui)抗體的要求差異巨大:

WB(Western Blot):需高(gao)特異性抗體(ti),避免交(jiao)叉反應。

IHC/IF(免疫組化/熒光):要求抗(kang)體能識別天然(ran)構(gou)象的抗(kang)原。

流式細胞術(shu):優先選擇經固定(ding)和(he)透(tou)化處理(li)驗證的抗體。務必查看廠家(jia)標注(zhu)的“已驗證應用”!

3.2、宿主物種匹配性:抗體(ti)的宿主物種需與實驗樣本(ben)物種不同。例如:檢測(ce)小鼠蛋白時,選(xuan)擇兔、羊等非鼠源(yuan)抗體(ti),避(bi)免二抗交叉(cha)反應。驗證數據(ju)越全(quan),可靠(kao)性(xing)越高(gao)

3.3、優(you)質抗(kang)體應提(ti)供:清晰的WB條帶圖、IHC染色圖等實驗結(jie)果(guo)。陽(yang)性對(dui)照(zhao)和(he)陰性對(dui)照(zhao)數據。用(yong)戶(hu)發表的文獻引用(yong)(可在廠家官網查詢)。

3.4、單克隆 vs 多克隆抗體單克隆抗體:特異性(xing)高,批次穩定性(xing)好,適(shi)合定量實驗(yan)。多(duo)克隆(long)抗體:靈敏度高,成本較低,適(shi)合檢測(ce)低豐度蛋白(bai)。價格(ge)與售后服務

四、國(guo)內(nei)外優質抗體廠(chang)家推薦

五、抗體使用(yong)小貼士

文獻輔助(zhu)篩選:在PubMed中搜索目標(biao)蛋白+實(shi)驗(yan)技(ji)術(shu)(如“p53 IHC antibody”),參考高(gao)影響力論文使用的品牌。

分裝保存(cun):收到抗體(ti)后按50μL分裝,避免反復凍融。

活用陰性對照(zhao):確保(bao)實驗(yan)結果(guo)的可靠性,尤其是新抗體首次使(shi)用時。

六、小結

挑選抗(kang)體(ti)如同(tong)“量(liang)體(ti)裁衣”,需結合實驗(yan)(yan)目(mu)標、預算和廠(chang)家(jia)技術支持綜合考量(liang)。初期可優先選擇驗(yan)(yan)證數據全面的國際品牌,積累經(jing)驗(yan)(yan)后再嘗試性價比更高的國產(chan)替代。你常用(yong)的抗(kang)體(ti)廠(chang)家(jia)是哪(na)個?歡迎留(liu)言分享心得!派森諾竭誠為大家(jia)提(ti)供國內外品牌抗(kang)體(ti),助力每(mei)一(yi)位生命(ming)科學實驗(yan)(yan)室的科研人收獲屬于自己的完美實驗(yan)(yan)結果,逐夢(meng)高分文章(zhang)~

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