2025-07-04
研(yan)究物種(zhong)：小鼠
發表期刊： Chinese Medicine
發表時間：2024年
影響因子：5.3
文章亮(liang)點
研究(jiu)通(tong)過結合(he)(he)網絡藥(yao)理學(xue)預測和實驗驗證(zheng)的(de)(de)(de)(de)方(fang)法，系(xi)統(tong)地探(tan)討了(le)(le)(le)葛根芩連湯（Gegen Qinlian Decoction, GQD）對伊立(li)替(ti)康（irinotecan）誘導的(de)(de)(de)(de)腹(fu)(fu)瀉(xie)的(de)(de)(de)(de)緩(huan)解(jie)作(zuo)用(yong)(yong)。這(zhe)種(zhong)(zhong)方(fang)法不(bu)僅有(you)助于(yu)發(fa)現潛在(zai)的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)機(ji)制，還提供了(le)(le)(le)實驗證(zheng)據支(zhi)持。研究(jiu)揭示(shi)了(le)(le)(le)GQD通(tong)過調節(jie)PI3K/AKT/NF-κB信號軸來(lai)減(jian)輕伊立(li)替(ti)康引起的(de)(de)(de)(de)腸道(dao)炎癥反應(ying)。這(zhe)一發(fa)現為(wei)理解(jie)GQD如何發(fa)揮其(qi)抗炎效(xiao)(xiao)果提供了(le)(le)(le)一個新(xin)的(de)(de)(de)(de)視角，并可(ke)能指導未(wei)來(lai)針(zhen)對該通(tong)路開發(fa)更(geng)有(you)效(xiao)(xiao)的(de)(de)(de)(de)治療(liao)策略(lve)。基于(yu)網絡藥(yao)理學(xue)分析，文(wen)章指出GQD含有(you)多種(zhong)(zhong)活(huo)性(xing)成分，這(zhe)些成分能夠作(zuo)用(yong)(yong)于(yu)多個生物(wu)靶點，從而產(chan)生綜(zong)合(he)(he)性(xing)的(de)(de)(de)(de)治療(liao)效(xiao)(xiao)果。這(zhe)表(biao)明傳(chuan)統(tong)中(zhong)藥(yao)復方(fang)在(zai)復雜疾病(bing)治療(liao)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)優勢(shi)——即(ji)通(tong)過調控多個路徑達(da)到(dao)整體平衡。鑒于(yu)伊立(li)替(ti)康是臨床(chuang)上常用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)抗癌藥(yao)物(wu)之一，但常伴(ban)隨嚴(yan)重(zhong)的(de)(de)(de)(de)副作(zuo)用(yong)(yong)如嚴(yan)重(zhong)腹(fu)(fu)瀉(xie)，本(ben)研究(jiu)結果提示(shi)GQD作(zuo)為(wei)一種(zhong)(zhong)輔(fu)助療(liao)法，在(zai)改(gai)善患者(zhe)生活(huo)質(zhi)量方(fang)面具有(you)重(zhong)要(yao)價值。此外，對于(yu)其(qi)他(ta)類(lei)型的(de)(de)(de)(de)化療(liao)相(xiang)關性(xing)腹(fu)(fu)瀉(xie)也可(ke)能具有(you)相(xiang)似的(de)(de)(de)(de)應(ying)用(yong)(yong)前景。這(zhe)項工作(zuo)展示(shi)了(le)(le)(le)現代科學(xue)技術（如計算生物(wu)學(xue)）與(yu)傳(chuan)統(tong)中(zhong)醫(yi)藥(yao)知(zhi)識之間成功(gong)融合(he)(he)的(de)(de)(de)(de)例子，促(cu)進了(le)(le)(le)不(bu)同領(ling)域之間的(de)(de)(de)(de)交流與(yu)合(he)(he)作(zuo)，為(wei)探(tan)索更(geng)多高(gao)效(xiao)(xiao)低毒的(de)(de)(de)(de)天然產(chan)物(wu)奠定了(le)(le)(le)基礎。
研究背(bei)景
伊(yi)立替康（CPT-11）化療(liao)所致腹瀉（CID）常見且(qie)影響(xiang)治療(liao)，目前(qian)缺乏標(biao)準療(liao)法。中藥(yao)在緩解化療(liao)副作用(yong)方面(mian)(mian)受關(guan)注，以往研(yan)究(jiu)(jiu)表明葛根(gen)芩(qin)連方可(ke)緩解CPT-11所致腹瀉，但(dan)臨(lin)床應用(yong)面(mian)(mian)臨(lin)挑戰。本研(yan)究(jiu)(jiu)制(zhi)備其標(biao)準湯劑，探究(jiu)(jiu)對CPT-11所致腹瀉的緩解作用(yong)及機制(zhi)，為臨(lin)床應用(yong)提供依據(ju)。
研(yan)究思路
本研究先制(zhi)備葛根(gen)芩連(lian)標準(zhun)湯(tang)(tang)劑（GQD標準(zhun)湯(tang)(tang)劑），采(cai)用LC-MS技(ji)術結合網(wang)絡(luo)藥(yao)理學分析其成分與機(ji)制(zhi)，通(tong)過SN-38激活的(de)(de)NCM460細胞和(he)(he)CPT-11誘導的(de)(de)腹瀉模型進行體外和(he)(he)體內實驗，研究其抗炎活性與腸道屏障(zhang)功能相關(guan)作用，驗證關(guan)鍵(jian)蛋白(bai)和(he)(he)通(tong)路。
研究方法(fa)
代謝(xie)組(zu)，網(wang)絡藥理(li)學
研究結果
1. GQD標準湯劑成分鑒定
通過(guo)UPLC - Q - TOF/MS分析，在(zai)GQD標(biao)準湯劑中鑒定出(chu)130種(zhong)(zhong)成分，包括75種(zhong)(zhong)黃(huang)酮類(lei)、13種(zhong)(zhong)生物(wu)堿等，主要來源(yuan)為(wei)黃(huang)芩(qin)、甘草、葛根、黃(huang)連，對其中11種(zhong)(zhong)成分定量分析。
圖(tu)1 GQD標準湯(tang)劑正、負模式下的總離(li)子(zi)流色譜圖(tu)及(ji)11種混(hun)合(he)標準品的色譜圖(tu)
2. 網絡藥理學分析結(jie)果(guo)
從130種成分中篩選(xuan)出37種活(huo)性化合物(wu)，其相關的94個(ge)預測蛋(dan)白(bai)(bai)與疾(ji)病相關的1417個(ge)蛋(dan)白(bai)(bai)取交集，得到74個(ge)重疊蛋(dan)白(bai)(bai)。對這些蛋(dan)白(bai)(bai)進行(xing)分析，確定核心蛋(dan)白(bai)(bai)，同時GO和(he)KEGG分析揭示了相關生物(wu)過程和(he)通路(lu)。
圖2 網(wang)絡藥理學預(yu)測結果
圖3 化(hua)合物(wu)-靶標(biao)-通(tong)路-疾(ji)病通(tong)路網(wang)絡
3. GQD標準湯(tang)劑對NCM460細胞的影響
確定GQD標準湯劑(ji)在NCM460細(xi)(xi)胞(bao)中的無毒劑(ji)量，發(fa)現其可(ke)緩解SN - 38誘(you)導的細(xi)(xi)胞(bao)損傷，提高細(xi)(xi)胞(bao)活力，降低細(xi)(xi)胞(bao)分泌(mi)的IL - 6、IL - 1β和TNF - α水(shui)平，且抑制PI3K/AKT/NF - κB通路相關蛋白的mRNA表達(da)。
圖4 GQD標準湯(tang)劑對NCM460細胞活力、炎癥因子產生及相關(guan)mRNA水平的影響
4. GQD標準湯(tang)劑對CPT - 11誘導(dao)腹瀉小鼠的(de)作用(yong)
在體內實驗中，GQD標準湯劑可減(jian)輕CPT - 11誘導的(de)小鼠結腸(chang)縮短，改善體重和疾病(bing)活動指數（DAI），H&E和PAS染色顯示其可保護腸(chang)道組織，減(jian)少炎(yan)癥和維(wei)持黏液水平，同時(shi)增強緊密連(lian)接蛋白Occludin和ZO - 1的(de)表達(da)。
圖5 小鼠建模及治療周期、結腸(chang)照片、長度、體重、DAI及組(zu)織染色情(qing)況(kuang)
參考文獻
Chen J, Li M, Chen R, Xu Z, Yang X, Gu H, Zhang L, Fu C, Zhang J, Wu Y. Gegen Qinlian standard decoction alleviated irinotecan-induced diarrhea via PI3K/AKT/NF-κB axis by network pharmacology prediction and experimental validation combination. Chin Med. 2023 Apr 27;18(1):46. doi: 10.1186/s13020-023-00747-3. PMID: 37106406; PMCID: PMC10134581
