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【派森諾項目文章】豬腸道微生物組研究新思路,揭示抗生素的有效替代品!

2017-02-22

派森諾生(sheng)物在豬腸(chang)道微生(sheng)物組(zu)研究領域已積累了(le)豐富的(de)經(jing)驗。繼(ji)2015年與南京農業大學合作,在《Scientific Reports》發表相關論文之后,本月又再度牽手,再次登陸《Scientific Reports》(最新影響因子5.228),進一步揭示了糞腸球菌(Enterococcus faecalis)在豬腸道(dao)中類似于抗(kang)生素的生理作(zuo)用。


研究背景

抗生素可謂是一把雙刃劍。一方面,它能幫助我們人類和動物遠離致病微生物的感染;另一方面,對抗生素的過度依賴又致使微生物形成廣泛的抗生素抗性機制,甚至出現了“超級細菌”。因此,抗生素已被視為人類和動物健康的直接威脅之一。而在豬的飼養繁殖過程中,抗生素已被廣泛使用50余年,以應對多種傳染病的侵襲(xi),使其得以健康成長。因此,尋找抗(kang)生素的可靠替代品,并改善人類(lei)和動物的健康已迫在眉睫(jie)。


研究目的

糞腸球菌(Efaecalis)是腸道內常見的乳酸產生菌,有潛在的益生作用,并能分泌細菌素,抑制致病菌的生長。此項研究的前期實驗結果已表明,在斷奶仔豬的飼料中適量添加糞腸球菌UC-100菌株(200 g/t≥ 1 × 1010CFU/g)能有效降低仔豬(zhu)腹瀉的概率,起到類似(si)于(yu)抗生素治療的效果,但該菌株如何影響腸道(dao)微生物組、進(jin)而改善動物健康(kang),仍需(xu)進(jin)一(yi)步研(yan)究。本研(yan)究即(ji)以此為(wei)出發點,評價該菌株與抗生素對于(yu)腸道(dao)菌群的影響效果及其(qi)異(yi)同。


研究方法

測序技術:Illumina MiSeq高通量測序平臺

測序模式:微生物組16S rRNA基因V4區測序

實驗對象:25日齡斷奶仔豬

實驗設計:正常飼料組、抗生素添加組、糞腸球菌添加組各4頭,并采集飼喂0天、14天、28天的糞便樣本


研究結果

36份豬糞便樣本進行高通量測序,共獲得2,355,992條序列,每樣本平均獲得51,298條高質量序列,并在97%的序列相似度水平歸并為9,966OTU,共包含21個門。其中,Firmicutes門占有絕對優勢地位,占總體測序量的85%以上;TenericutesBacteroidetes門次之,但相對豐度只占1%左右。

 

三組仔豬在飼喂0天、14天、28天的腸道微生物組多樣性(ACE指數和OTU數)比較。由圖可知,在任一時間點,糞腸球菌添加組和抗生素添加組的多樣性水平均無顯著差異。


 

Weighted UniFrac PCoA分(fen)析顯示,在飼喂(wei)14天(圖A-C)和28天(圖D-F)時,糞腸球菌添加組和抗生素添加組的腸道菌群組成并無顯著差異。雖然在飼喂14天時,兩組樣本在PC3主坐標方向上有區分趨勢,但并未達到差異顯著性(圖B-CP = 0.063)。


 

Fibrobacteres門在飼喂28天(tian)的(de)正常(chang)飼料組(zu)(zu)中的(de)豐度激增,但在(zai)糞腸(chang)球菌添加組(zu)(zu)中豐度顯(xian)著降低。在(zai)任一時間點,該門的(de)豐度在(zai)糞腸(chang)球菌添加組(zu)(zu)和抗生(sheng)素添加組(zu)(zu)中無顯(xian)著差異。


 

飼喂28天時,相對于正常飼料組,在糞腸球菌添加組和/或抗生素添加組豐度發生顯著變化的細菌屬,但這些屬的豐度在糞腸球菌添加組和抗生素添加組間并無顯著差異。


總結

本研(yan)(yan)究(jiu)的(de)一大(da)特色(se)在于(yu),并不執(zhi)著(zhu)于(yu)想方設(she)法(fa)證(zheng)明(ming)“組間差(cha)異(yi)”有多顯著(zhu),而是通過多樣性和豐(feng)度比較,證(zheng)明(ming)糞腸球菌(jun)添加組和抗(kang)生素添加組的(de)菌(jun)群無明(ming)顯差(cha)異(yi),從(cong)而提示我們,糞腸球菌(jun)有較大(da)潛力(li)發(fa)展成為抗(kang)生素的(de)有效(xiao)替代品。這一研(yan)(yan)究(jiu)新思(si)路對于(yu)微生物組的(de)大(da)數據(ju)分析(xi)的(de)啟發(fa)很大(da)!

本研究的測(ce)序和數據分析(xi)工(gong)作由上海派森諾生物科(ke)技股份有(you)限公司(si)完成。

文章索引:

Li, P., Niu, Q., Wei, Q., Zhang, Y., Ma, X., Kim, S.W., Lin, M., and Huang, R. (2017). Microbial shifts in the porcine distal gut in response to diets supplemented with Enterococcus Faecalis as alternatives to antibiotics. Scientific Reports 7, 41395. doi: 10.1038/srep41395

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