2015-11-30
鱖魚(Siniperca chuatsi)為重要的經濟魚類,是分布很廣的淡水魚類。鱖魚易受病毒侵染,嚴重影響鱖魚的產量及經濟價值。為闡明鱖魚的感病機理及免疫機制,華中農業大學林蠡教授和他的團隊應用轉錄組從頭測序方法,對未感染和感染傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)24h和72h的鱖魚腦細胞進行了基因轉錄水平的研究,結果為ISKNV致病的機制提供了新的見解。研究成果Transcriptomic analysis of Mandarin ?sh brain cells infected with infectious spleen and kidney necrosis virus with an emphasis on retinoic acid-inducible gene 1-like receptors and apoptosis pathways 于近期發表在Fish & Shellfish Immunology(影響因子2.674)雜志上。鱖魚的轉錄組測序及信息分析工作,由上海派森諾生物科技股份有限公司完成,這也是派森諾生物繼兩篇比目魚轉錄組測序、一篇武昌魚轉錄組測序、一篇青海湖裸鯉轉錄組測序后的第五篇魚類轉錄組測序文章。
研究人員以未感染和感染了傳染性脾腎壞死病毒的鱖魚為研究對象,利用Illumina HiSeq 2000平(ping)臺對鱖魚腦細胞進行轉錄組測序分析。共獲得了96,206,040條高質量的reads,經過軟件拼接組裝,得到了 66,787 個unigenes 。感染病毒24h和72 h后的樣本與未感染病毒的腦細胞樣本相比,分別有10834和7584個基因差異表達,其中包括上調基因5445和3766個,下調基因5389和3818個。另外,研究通過qPCR實驗驗證了12個差異表達基因,這些差異表達基因參與了許多病毒發病機理的路徑。
對這些(xie)主(zhu)要的(de)(de)(de)差異表達(da)基因的(de)(de)(de)RLRs通(tong)(tong)(tong)(tong)路和細胞凋(diao)亡(wang)(wang)通(tong)(tong)(tong)(tong)路進(jin)行進(jin)一步分析結(jie)果顯示:RLRs通(tong)(tong)(tong)(tong)路中ISKNV感染會通(tong)(tong)(tong)(tong)過高表達(da)IKKB-α和IKKB-β以及低表達(da)與激酶4(IRAK4)受體關聯(lian)的(de)(de)(de)白細胞介(jie)素-1抑制NF-kB的(de)(de)(de)活性(xing);細胞凋(diao)亡(wang)(wang)通(tong)(tong)(tong)(tong)路中ISKNV感染主(zhu)要是(shi)通(tong)(tong)(tong)(tong)過腫瘤壞死因子(TNF)介(jie)導的(de)(de)(de)外源途(tu)徑誘導細胞凋(diao)亡(wang)(wang)。這些(xie)結(jie)果為ISKNV致病的(de)(de)(de)機(ji)制提供了新的(de)(de)(de)見解;同時該研究獲得了大量的(de)(de)(de)表達(da)差異的(de)(de)(de)unigenes,說明利用Illumina HiSeq 2000平臺可以快速而(er)有效地獲取鱖(gui)魚腦(nao)細胞的(de)(de)(de)轉錄本信息。
分析結果展示:
圖1 GO基因功(gong)能注釋
圖2 COG基因功能注釋
圖3 表達差異基因GO富(fu)集分析
圖4 qPCR驗(yan)證
原文索引:Hu X, Fu X, Li N, et al. Transcriptomic analysis of Mandarin fish brain cells infected with infectious spleen and kidney necrosis virus with an emphasis on retinoic acid-inducible gene 1-like receptors and apoptosis pathways[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2015, 45:619–629. doi:10.1016/j.fsi.2015.05.007
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本文由派(pai)森諾RNA-Seq團隊喬慧瑩整理