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高通量測序與代謝組聯合分析揭示柑桔大實蠅滯育期分子機制

2017-11-03

研究背景:

柑桔(jie)大實蠅(ying),又名桔(jie)大實蠅(ying),柑桔(jie)大果蠅(ying)。被害(hai)果稱“蛆(qu)果”、“蛆(qu)柑”。實蠅(ying)是植(zhi)(zhi)食性昆蟲,每年秋(qiu)季(ji)是其產卵的活(huo)躍期,它們(men)通過尾部(bu)的排(pai)卵器“注射”到(dao)植(zhi)(zhi)物的果實當(dang)中進行(xing)孵化。而幼(you)蟲則危害(hai)植(zhi)(zhi)物各部(bu),從根、莖、葉、花(hua)乃至果實。

為了(le)更好(hao)的(de)闡明柑桔大(da)實蠅滯育期的(de)分(fen)子生(sheng)物(wu)(wu)學機(ji)制,西南大(da)學王(wang)佳課題(ti)組聯(lian)合派森諾生(sheng)物(wu)(wu)利用高通量測序(xu)技術研究五個蛹發育時期的(de)基(ji)因變(bian)化規律,該結果揭示了(le)整個滯育期生(sheng)理通路的(de)變(bian)化,也為柑桔大(da)實蠅滯育過程研究帶來新的(de)思路。


研究結果:

五個(ge)發育時期(PreD,ED,MD,LD,PD)的(de)(de)組間兩兩比較共發現4808個(ge)顯著差(cha)異(yi)基(ji)(ji)(ji)因(yin),校(xiao)正之后共發現3290個(ge)差(cha)異(yi)基(ji)(ji)(ji)因(yin),這些(xie)差(cha)異(yi)基(ji)(ji)(ji)因(yin)主要分布在內分泌(mi)系統(tong)和(he)消化系統(tong)中(zhong)的(de)(de)代謝和(he)信號轉導相關(guan)通路中(zhong),利用表達模(mo)式的(de)(de)不(bu)同將這些(xie)差(cha)異(yi)基(ji)(ji)(ji)因(yin)分為六類,其(qi)中(zhong)一類和(he)三類中(zhong)的(de)(de)基(ji)(ji)(ji)因(yin)在PreD和(he)PD兩個時期(qi)中高表達(da),四(si)類(lei)中的基因在PreD時期(qi)中高表達。

本研究利用KEGG代(dai)(dai)(dai)謝(xie)通(tong)路富集分析近一步研究這些差異基(ji)(ji)因(yin)的潛在功(gong)能,結果顯示:MD和(he)LD組間(jian)兩兩比較差異基(ji)(ji)因(yin)主要富集在丙氨酸(suan),天冬氨酸(suan)和(he)谷氨酸(suan)代(dai)(dai)(dai)謝(xie)途徑,其他組比較中(zhong),差異基(ji)(ji)因(yin)主要富集在碳水化合(he)(he)物(wu)代(dai)(dai)(dai)謝(xie),脂質(zhi)代(dai)(dai)(dai)謝(xie),氨基(ji)(ji)酸(suan)代(dai)(dai)(dai)謝(xie),其他次生代(dai)(dai)(dai)謝(xie)物(wu)的生物(wu)合(he)(he)成(cheng),外源性物(wu)質(zhi)降解和(he)代(dai)(dai)(dai)謝(xie),信(xin)號(hao)轉導等相(xiang)關(guan)通(tong)路中(zhong)。

 

圖1.組間(jian)兩兩比較差異(yi)基因


 

圖(tu)2.PCA主成分分析


 

圖3.差異基因聚類熱圖


本研究挑(tiao)選21個(ge)差異基(ji)因進行qRT-PCR驗證,將qRT-PCR數(shu)(shu)(shu)據(ju)(ju)與轉錄(lu)組數(shu)(shu)(shu)據(ju)(ju)比較,發(fa)現他們之前相關(guan)性很(hen)高,結果證明了轉錄(lu)組數(shu)(shu)(shu)據(ju)(ju)真實可信。

 

圖4.轉錄(lu)組(zu)數據與(yu)qRT-PCR的相關性驗(yan)證


研究結論:

本(ben)研(yan)究利用轉錄(lu)組和(he)代謝組分(fen)析闡明了蛹發育(yu)(yu)階段的(de)不同差(cha)異表達(da)的(de)基(ji)因(yin)和(he)相關(guan)代謝通路,該研(yan)究為柑桔(jie)大(da)實蠅滯育(yu)(yu)期分(fen)子(zi)功能研(yan)究奠定基(ji)礎,部分(fen)相關(guan)差(cha)異基(ji)因(yin)還需近一步(bu)研(yan)究,以確(que)定其和(he)滯育(yu)(yu)期的(de)關(guan)系。

參考文獻:Wang J, Fan H, Xiong K C, et al. Transcriptomic and metabolomic profiles of Chinese citrus fly, Bactrocera minax (Diptera: Tephritidae), along with pupal development provide insight into diapause program.[J]. Plos One, 2017, 12(7):e0181033.