2018-06-11
第三代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)技(ji)術(shu)(shu)是(shi)指單(dan)分子(zi)測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)技(ji)術(shu)(shu)。與二(er)代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)相(xiang)比，三代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)不(bu)需要經(jing)過PCR擴增(zeng)，實現了對(dui)每一條DNA分子(zi)的(de)單(dan)獨測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)。由此可見，不(bu)依(yi)賴于PCR的(de)三代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)對(dui)原始(shi)投入DNA的(de)質量和總量要求是(shi)很高的(de)。另外，第三代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)還(huan)可以(yi)進行全長(chang)16s/18s測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)、擴增(zeng)子(zi)和全長(chang)轉(zhuan)錄組(zu)測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)。當然，三代測(ce)(ce)(ce)序(xu)(xu)平臺還(huan)可以(yi)做(zuo)其他很多事情，在此就不(bu)一一贅述啦！
為了解決(jue)老師對(dui)三代基因組、多(duo)樣(yang)(yang)(yang)性和(he)全(quan)長轉錄組測序(xu)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)和(he)DNA或者RNA相關要求的(de)疑(yi)問(wen)，方便(bian)實驗的(de)展(zhan)開，我們專門(men)總結了常見樣(yang)(yang)(yang)本(ben)和(he)核(he)酸的(de)送樣(yang)(yang)(yang)要求以及標準。對(dui)于一(yi)些沒有提(ti)及到(dao)的(de)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)類型可以咨詢我們的(de)銷售哦~
），使用移液(ye)器充分吹打使細胞(bao)裂(lie)解，將(jiang)細胞(bao)裂(lie)解液(ye)轉移至1.5ml無酶管中，-80℃保存，干冰運輸。
細胞總(zong)量要(yao)求：5-10×107個，請提供(gong)三次(ci)所需(xu)用量。
血液(ye)（切忌反復凍融，取樣(yang)到(dao)樣(yang)品提取最好(hao)不要超過15天）
全(quan)血(xue)(xue)：取新(xin)鮮血(xue)(xue)液1ml于含EDTA的抗凝管中，混勻，用移液器分裝到無酶的1.5ml離心管中，每管250ul，加入750ul TRIzol LS（Invitrogen 貨號：），混(hun)勻(yun)，液氮冷凍15min，-80℃冰箱保存，干冰運輸。
血(xue)漿：將使用抗(kang)凝管所得的血(xue)漿分裝入1.5ml的離心管中，每管1ml，液氮冷凍15min，-80℃冰箱保存，干冰運輸。
總量(liang)要求：請提供三(san)次(ci)所需用量(liang)
植物組織
盡量選取植物(wu)新(xin)鮮(xian)，幼嫩，生(sheng)長旺盛的組織(zhi)部位2g，擦凈表面灰塵和雜質，迅速放入已經寫好編號的螺紋凍存管中，液氮冷凍15min，-80℃冰箱保存，干冰運輸。
細菌，真菌
取2ml對數期的菌液于無酶管中，4℃，1000rpm，2min，去除上清，（菌體過老或培養基殘留會嚴重影響提取結果），液氮冷凍15min，-80℃冰箱保存，干冰運輸（有毒性、致病性和傳染性的樣品千萬不要寄送哦~）。
RNA樣品
RNA樣品(pin)需(xu)裝(zhuang)在(zai)無(wu)酶(mei)的1.5ml離心管中，物化狀態(tai)正常：無(wu)色(se)，透明(ming)，純凈無(wu)雜質的液體。濃度(du)＞300ng/ul，總量(liang)大于(yu)5ug（單次(ci)建庫所需(xu)用量(liang)），請準(zhun)備三(san)次(ci)所需(xu)量(liang)，2100檢(jian)測RIN值≥8.0，RNA檢(jian)測結果(是否符合后續實(shi)驗(yan))以實(shi)驗(yan)室實(shi)驗(yan)報告為準(zhun)。
以上(shang)就是這次介紹的所有內容(rong)啦，期待(dai)下次再見(jian)~
