2020-02-18
眾所周知,在中心(xin)法(fa)則上,蛋白質才(cai)是(shi)最終產物,才(cai)是(shi)生命(ming)活動(dong)的(de)主要承擔者(zhe)。對(dui)于做基礎(chu)科研的(de)眾多師生來說,基因(yin)(yin)表(biao)達豐度(du)卻是(shi)大(da)家最基礎(chu)的(de)數據之一,這(zhe)是(shi)因(yin)(yin)為大(da)部分的(de)人會選擇更加便利的(de)檢測技術手(shou)段來研究各種(zhong)生命(ming)現象的(de)機(ji)制(zhi)機(ji)理,例如實時熒光定量PCR(qPCR)或(huo)者(zhe)轉錄組測序(RNA-seq)技術,來快速獲(huo)得基因(yin)(yin)表(biao)達豐度(du),因(yin)(yin)此大(da)家潛意識里,在一定程度(du)上默認(ren)mRNA表(biao)達豐度(du)=蛋白表(biao)達豐度(du)。(當然,這(zhe)是(shi)很“危險”的(de)想(xiang)法(fa)哦。)
重要(yao)的(de)however來啦~2016年(nian)期(qi)刊Proteomics 有(you)文獻(xian)總結,轉(zhuan)錄組結果和蛋白組結果的(de)一致性非常低,原因有(you)多種:
1、mRNA降解速率;
2、核糖體結合位點;
3、核(he)糖體密(mi)度;
4、密碼子使用的偏好性;
5、蛋白(bai)質周(zhou)轉率;
6、翻譯后修飾(shi)等(deng)9種。
影(ying)響轉錄組數(shu)據與蛋白(bai)組數(shu)據一致性的因素
Doi:10.1002/pmic.201600140
這些(xie)原因大多(duo)是轉錄后(hou)水平(ping)的調(diao)控,在細(xi)胞內,mRNA豐(feng)(feng)(feng)度與實際(ji)翻譯豐(feng)(feng)(feng)度之(zhi)間有很大的差異,mRNA翻譯的過程受到任何的感(gan)染和調(diao)控都會顯著影(ying)響蛋(dan)白的豐(feng)(feng)(feng)度。因此(ci),在條件(jian)允(yun)許(xu)的情況下(xia),檢測(ce)翻譯豐(feng)(feng)(feng)度與檢測(ce)轉錄豐(feng)(feng)(feng)度同等重要,甚至更重要,因為翻譯豐(feng)(feng)(feng)度更接近(jin)下(xia)游(you)蛋(dan)白表達(da)水平(ping)。
研究翻譯組(zu)我們首先要記住以(yi)下幾個知識點
1、每條mRNA分子鏈上結合(he)的(de)核(he)糖體數目(mu)是有區(qu)別的(de)
mRNA分(fen)子(zi)鏈上既可以(yi)結(jie)(jie)合一個(ge)核(he)(he)糖體,也可以(yi)結(jie)(jie)合兩個(ge)核(he)(he)糖體,三個(ge)核(he)(he)糖體……大部分(fen)時候,可同時被多個(ge)核(he)(he)糖體結(jie)(jie)合,同時翻譯(yi)出多條肽(tai)鏈。所(suo)以(yi)即使一個(ge)基因在轉錄水平豐度較低,但是(shi)可能(neng)通(tong)過結(jie)(jie)合較多的核(he)(he)糖體,快速翻譯(yi)出大量(liang)的肽(tai)鏈,通(tong)過進一步的盤曲折疊(die)形(xing)成(cheng)具(ju)有空間結(jie)(jie)構的蛋白質。
mRNA分子結合核糖體示意圖
2、并(bing)不(bu)是每一條轉錄后(hou)的mRNA分子都可以成(cheng)功翻(fan)譯成(cheng)蛋白質
在動物體內,存(cun)在miRNA結合(he)mRNA分(fen)子,抑制翻譯過程(cheng),導致mRNA分(fen)子無法(fa)成(cheng)功翻譯成(cheng)蛋白質;在植物體內,廣泛存(cun)在著miRNA結合(he)mRNA分(fen)子,將mRNA分(fen)子降解成(cheng)小片段(duan),無法(fa)開展(zhan)翻譯過程(cheng)生成(cheng)蛋白質,此種情(qing)況下,連完(wan)整(zheng)的mRNA分(fen)子都“尸骨無存(cun)”。
翻譯(yi)組檢測技術(shu)和更(geng)多的翻譯(yi)組學知識,請(qing)持續關注上海派森(sen)諾公(gong)眾號(hao),畢竟,做科研,我們是認真的。