2020-05-09
2020年(nian)3月南京市婦幼(you)保健院在The Journal of Molecular Diagnostics雜志(zhi)上發(fa)表了(le)一篇(pian)題為《Carrier screening and prenatal diagnosis for Spinal Muscular Atrophy in 13069 Chinese pregnant women》的(de)大數(shu)據文章，展(zhan)示了(le)脊(ji)髓性(xing)肌(ji)萎縮癥攜帶者篩查基因(yin)檢(jian)測(ce)項目實施的(de)數(shu)據。
自2017年7月至2019年6月底共有13069名(ming)孕婦(fu)參與(yu)篩查(cha)，檢(jian)出攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)231名(ming)，攜(xie)帶(dai)(dai)率為1/56。共召(zhao)回207名(ming)攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)的(de)配偶(ou)參與(yu)篩查(cha)，配偶(ou)中篩出攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)10人，并對其中7對攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)夫婦(fu)進行了(le)產前診斷，產前診斷結果提(ti)示6例(li)(li)胎兒正常，1例(li)(li)胎兒為SMA患(huan)者(zhe)。
一(yi)、材料和方法
該臨(lin)床研究(jiu)于2017年7月(yue)1日至2019年6月(yue)30日在南京醫(yi)科(ke)(ke)大學附屬婦產科(ke)(ke)的(de)產前診斷科(ke)(ke)進(jin)行。共向36470名無SMA家族史的(de)孕婦提(ti)供(gong)了(le)SMA攜帶者篩查，其中接收了(le)13069個(ge)(ge)人，并(bing)(bing)從每個(ge)(ge)人中收集2ml外(wai)周血，采用(yong)SMN1基因外(wai)顯(xian)子缺(que)失檢測試劑盒結(jie)合qPCR的(de)方法對運動(dong)神經元存活基因1第(di)7號外(wai)顯(xian)子和(he)8號外(wai)顯(xian)子進(jin)行拷貝數相對定量。通過qPCR進(jin)行篩選，并(bing)(bing)使用(yong)MLPA確認外(wai)顯(xian)子7雜合缺(que)失的(de)女性及其伴侶的(de)SMN1基因拷貝數。
二、篩查流程
在本研究中，我們使用(yong)了一個(ge)三(san)階(jie)段的逐步(bu)篩選程序：
【1】對孕婦(fu)的SMA攜(xie)帶者狀況進行了檢測；
【2】如果該婦女被(bei)確定(ding)為(wei)SMA攜帶者，則召(zhao)回其伴侶進行攜帶者篩(shai)查；
【3】如(ru)果(guo)雙方都是(shi)SMA攜帶者，則提供遺傳(chuan)咨詢和產前診斷(duan)。
三、結果
在13069名(ming)進(jin)行SMA攜帶者(zhe)篩查的婦(fu)女(nv)中，發現有231名(ming)是SMA攜帶者(zhe)（1.77％，95％CI，1.56％-2.01％），表(biao)明人(ren)群(qun)攜帶率約為1/56(Table 2)。
在(zai)這231個(ge)(ge)(ge)SMN1外(wai)顯(xian)(xian)子(zi)7雜(za)合缺失的健康攜(xie)帶者中，有212例同時具(ju)有一(yi)個(ge)(ge)(ge)外(wai)顯(xian)(xian)子(zi)7和(he)8的拷貝，另外(wai)19例具(ju)有一(yi)個(ge)(ge)(ge)外(wai)顯(xian)(xian)子(zi)7拷貝和(he)≥2個(ge)(ge)(ge)外(wai)顯(xian)(xian)子(zi)8拷貝。
在12095例(li)(li)中發(fa)現(xian)了(le)2個SMN1外顯(xian)子(zi)(zi)(zi)7拷貝（92.55％，95％CI 92.08％-92.99％），包(bao)(bao)括65例(li)(li)1拷貝，11807例(li)(li)2拷貝和223例(li)(li)3個或更多(duo)外顯(xian)子(zi)(zi)(zi)8拷貝。共有743人（5.68％，95％ CI 5.30％-6.10％）具有≥3外顯(xian)子(zi)(zi)(zi)7拷貝，包(bao)(bao)括1例(li)(li)1拷貝，30例(li)(li)2拷貝和712例(li)(li)≥3 外顯(xian)子(zi)(zi)(zi)8拷貝(Table 3).
所(suo)有為SMA攜帶者的孕婦(fu)均接受了詳細的遺傳咨詢(xun)，包括病因(yin)，遺傳模式，臨床特征，生(sheng)殖風險和SMA的治療(liao)情況等。
在充分了(le)解該疾病后，召回了(le)207個(ge)伴侶(lv)(lv)（89.61％，95％CI 85.01％-92.92％），并通過MPLA測(ce)試(shi)了(le)SMN1外顯子(zi)7拷(kao)貝數，其中10對(dui)(dui)伴侶(lv)(lv)被(bei)確(que)認均是SMA攜帶者(zhe)。雙(shuang)方都被(bei)確(que)定為(wei)攜帶者(zhe)的10對(dui)(dui)夫婦接受了(le)SMA產(chan)前診斷(duan)，其中三對(dui)(dui)夫婦由于侵入性產(chan)前檢(jian)查的風險而拒(ju)絕接受此項檢(jian)查，其余七名母親則通過羊水穿(chuan)刺(ci)術進行(xing)了(le)產(chan)前診斷(duan)。
結果顯示了6個胎兒(er)(er)未受影響，包(bao)括1例(li)1個拷(kao)貝(bei)(bei)(bei)和(he)5例(li)2個SMN1外顯子7拷(kao)貝(bei)(bei)(bei)的胎兒(er)(er)。確定剩余的1例(li)胎兒(er)(er)為SMA，SMN1外顯子7和(he)8為0拷(kao)貝(bei)(bei)(bei)和(he)SMN2的2拷(kao)貝(bei)(bei)(bei)，胎兒(er)(er)父母仔細考慮后決(jue)定終止(zhi)妊娠。
四、討論(lun)
SMA屬于攜帶率高(gao)、發病率高(gao)的致(zhi)殘(can)致(zhi)死(si)的嚴重(zhong)性(xing)疾(ji)病，位列(lie)位列(lie)兒童致(zhi)死(si)性(xing)常染色體遺傳病第2位。
在(zai)不(bu)同種族中，SMA的攜帶率大約(yue)為0.98％至2.02％。因此(ci)，美國婦(fu)(fu)產科學院（ACOG）和ACMG建(jian)議，應向所有計劃(hua)懷(huai)孕(yun)(yun)或已經(jing)懷(huai)孕(yun)(yun)的婦(fu)(fu)女提供(gong)SMA的攜帶者篩查，從(cong)而預防新(xin)生兒出生缺陷。
當胎(tai)兒(er)被確(que)診為SMA患(huan)兒(er)時，遺傳咨詢對(dui)患(huan)兒(er)的(de)父(fu)母(mu)非常重要(yao)，SMA的(de)臨床表型(xing)范圍從最嚴(yan)重的(de)SMA I型(xing)到最輕度的(de)SMA IV型(xing)，根(gen)據SMN2的(de)拷貝數，應將發病年齡以及可(ke)能的(de)癥狀告知(zhi)患(huan)兒(er)的(de)父(fu)母(mu)，在(zai)遺傳咨詢的(de)過程(cheng)中，不能忽視告知(zhi)SMA的(de)治療(liao)(liao)藥(yao)物，諾西那(nei)生(sheng)鈉注射(she)液（美國及歐盟注冊商品名SPINRAZA?），是國內(nei)首個國家藥(yao)品監督管理(li)局(NMPA)批準(zhun)的(de)SMA治療(liao)(liao)藥(yao)物，國內(nei)價格為70萬/支(zhi)，負荷量(liang)4支(zhi)，維持量(liang)每年2支(zhi)，即(ji)第一(yi)年6支(zhi)，隨后(hou)每年2支(zhi)。SMA的(de)早期診斷和新的(de)有效療(liao)(liao)法可(ke)以改善SMA患(huan)者的(de)臨床結局。但(dan)是，臨床醫生(sheng)和SMA家庭應考慮與治療(liao)(liao)相關的(de)相關安全性和高財(cai)務負擔。
現(xian)階段(duan)，科學(xue)(xue)的產(chan)前篩查比患病后的治療(liao)，更具有衛生經濟學(xue)(xue)意義。
SMA為(wei)(wei)(wei)常染色體隱性(xing)遺(yi)傳病，在(zai)(zai)已(yi)明確診(zhen)斷(duan)的SMA家(jia)庭(ting)中，每生育(yu)一胎(tai)的再發(fa)風險為(wei)(wei)(wei)25％，男女患(huan)病機會均等。患(huan)兒父母多為(wei)(wei)(wei)SMN1單拷貝攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)(zhe)，但(dan)需要注(zhu)意的是，雖然SMN1基(ji)因第(di)(di)7和(he)(he)第(di)(di)8外(wai)顯(xian)子這兩個(ge)位點的缺(que)失(shi)突變(bian)(bian)占SMN1的95%以(yi)上(shang)(shang)，但(dan)此檢測陰(yin)性(xing)時僅能(neng)排除SMN1基(ji)因第(di)(di)7和(he)(he)第(di)(di)8外(wai)顯(xian)子缺(que)失(shi)突變(bian)(bian)，不(bu)能(neng)排除其(qi)它(ta)比例(li)很低的SMN1基(ji)因其(qi)它(ta)區(qu)域(yu)的點突變(bian)(bian)以(yi)及1條(tiao)5染色體上(shang)(shang)有兩個(ge)SMN1基(ji)因、另一條(tiao)5號染色體上(shang)(shang)的SMN1基(ji)因存在(zai)(zai)SMN1第(di)(di)7和(he)(he)/或第(di)(di)8外(wai)顯(xian)子缺(que)失(shi)的情形（“2+0”類(lei)型），約有4％的SMA攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)(zhe)為(wei)(wei)(wei)“2+0”類(lei)型。目前的技術并不(bu)能(neng)直(zhi)接檢測出“2+0”類(lei)型攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)(zhe)，需要依據確診(zhen)的SMA患(huan)者(zhe)(zhe)父母的SMN1基(ji)因拷貝數(shu)結合家(jia)族(zu)史調(diao)查確定。對于(yu)“2+0”類(lei)型攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)(zhe)家(jia)庭(ting)的再發(fa)風險和(he)(he)產前診(zhen)斷(duan)策略與SMN1單拷貝攜(xie)帶(dai)(dai)者(zhe)(zhe)相同。
五、如(ru)何進行SMA攜帶者篩(shai)查？
目前，檢測SMN1基因(yin)的(de)(de)拷貝數(shu)是攜帶(dai)者(zhe)篩(shai)查(cha)(cha)和臨(lin)床確診的(de)(de)重要(yao)手段。派(pai)森諾生物——SMA攜帶(dai)者(zhe)篩(shai)查(cha)(cha)采用(yong)的(de)(de)是創(chuang)新的(de)(de)實(shi)時定量(liang)PCR檢測技術，有效(xiao)控制了SMN2基因(yin)對檢測結果的(de)(de)影響，確保準確性，既可(ke)用(yong)于SMA攜帶(dai)者(zhe)篩(shai)查(cha)(cha)，也(ye)可(ke)用(yong)于SMA疾病(bing)輔助(zhu)診斷。臨(lin)床操作(zuo)十分簡便，檢測時僅(jin)需(xu)要(yao)抽取2mL外周血。
