2020-12-07
小伙伴們大概(gai)已經(jing)發(fa)現(xian)了(le)(le),無論哪篇單細(xi)胞(bao)(bao)測序的文章,都會告訴讀(du)者一共獲得了(le)(le)多(duo)少個細(xi)胞(bao)(bao)進行分析,并且細(xi)胞(bao)(bao)的數(shu)量基本都在(zai)1萬(wan)以上,高分文章,細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)量則可達十幾(ji)萬(wan)甚至幾(ji)十萬(wan)。比如,這篇今年發(fa)表的nature文章,一共做了(le)(le)23個器(qi)官,捕(bu)獲到了(le)(le)35萬(wan)多(duo)個細(xi)胞(bao)(bao),堪稱航空母(mu)艦級(ji)別(bie)。
細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)量,為什么這么重要?細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)量,是越多越好嗎?高(gao)分(fen)文(wen)章(zhang),一般需(xu)要多少個細(xi)胞(bao)(bao)?我(wo)們(men)的研究中,該如何設定細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)量? 相信這些問題,小伙伴們一定都很關注吧。 細胞數量,為什么這么重(zhong)要? Bulk RNA測(ce)序,一(yi)(yi)般(ban)需要(yao)設置(zhi)三個(ge)生(sheng)物學重(zhong)復。常常有(you)(you)小伙伴會問,單細胞(bao)(bao)測(ce)序,怎么(me)設置(zhi)生(sheng)物學重(zhong)復呢?一(yi)(yi)般(ban)情況下,單細胞(bao)(bao)測(ce)序的一(yi)(yi)個(ge)細胞(bao)(bao),可(ke)視為一(yi)(yi)個(ge)重(zhong)復,當然,當目光(guang)聚焦到單個(ge)細胞(bao)(bao)個(ge)體(ti),生(sheng)物學重(zhong)復就需要(yao)是成千上萬級別(bie)了。細胞(bao)(bao)數目越(yue)(yue)多(duo),區(qu)別(bie)不同細胞(bao)(bao)之間的差異越(yue)(yue)精確,研究細胞(bao)(bao)間精細的差異意義越(yue)(yue)顯(xian)著。所以,提高細胞(bao)(bao)總數,是一(yi)(yi)個(ge)比較有(you)(you)意義的建議。 高分文章(zhang),一般(ban)需(xu)要多少個(ge)細(xi)胞? 高分文(wen)(wen)章(zhang),一(yi)般需要(yao)(yao)多少個細(xi)胞(bao)(bao)?統(tong)觀(guan)目(mu)前的(de)(de)單細(xi)胞(bao)(bao)測序(xu)文(wen)(wen)章(zhang),大(da)概分為(wei)兩類。一(yi)是對(dui)細(xi)胞(bao)(bao)圖譜的(de)(de)描(miao)繪,這(zhe)(zhe)樣的(de)(de)工作(zuo),對(dui)各(ge)類細(xi)胞(bao)(bao)做了精確描(miao)述,細(xi)胞(bao)(bao)總數(shu),大(da)概都達(da)到(dao)十萬以(yi)上。這(zhe)(zhe)樣的(de)(de)工作(zuo),通常會(hui)發(fa)很高的(de)(de)雜志,因為(wei)其數(shu)據(ju)是一(yi)個非常重(zhong)要(yao)(yao)的(de)(de)資源,對(dui)未來的(de)(de)科學研究具有很大(da)的(de)(de)意義(yi)。前面提到(dao)的(de)(de)這(zhe)(zhe)篇nature文(wen)(wen)章(zhang),就屬于這(zhe)(zhe)一(yi)類。 另外一類,則是以單細胞測序作為一種研究手段,著力于研究某一個生物學問題。這樣的文章,通常是更值得研究者借鑒的文章,對細胞總數的要求,也相對低一點,我們不妨挑選幾篇文章,做一個詳細的比較。 1、 發表雜志:Nature 發表時間:2020年 影響(xiang)因子:42.788 研究(jiu)領(ling)域(yu):神經發育 細胞分選:否 共計細(xi)胞數:59379 樣本數(shu):16 每樣本平(ping)均細(xi)胞數:3712 2、 發表雜志:Nature Neuroscience 發(fa)表時間:2020年 影響因(yin)子:20.271 研究(jiu)領域(yu):神(shen)經發育 細(xi)胞分選:否 共計細胞(bao)數(shu):28726 樣本(ben)數:4 每樣(yang)本平均(jun)細(xi)胞數:7182 3、 發表雜志:Nature Communications 發表時間:2020年 影響因子:12.121 研究領域:新冠 細胞分選:否 共計細胞數:13239 樣本數:5 每(mei)樣本平均(jun)細胞數(shu):2648 4、 發(fa)表雜志:Cell Reports 發表時間:2019年 影響因子(zi):8.109 研究(jiu)領(ling)域:胃癌 細胞分選(xuan):否 共(gong)計細胞數:56440 樣(yang)本數:13 每樣本平均細(xi)胞數(shu):4342 5、 發(fa)表(biao)雜志:Cell 發表時間:2020年 影響因子(zi):38.637 研究領域:腫瘤免疫 細(xi)胞分(fen)選(xuan):CD4+,CD8+ 共(gong)計細胞數:19839(CD4+), 10762(CD8+) 樣本數:7 每樣本平均細胞數:2834(CD4+),1538(CD8+) 6、 發表雜志(zhi):Cancer Discovery 發(fa)表時間:2020年 影響(xiang)因子:29.497 研究領域:腫瘤免疫 細(xi)胞(bao)分選(xuan):CAF-F1 共計(ji)細胞(bao)數(shu):18296 樣本數(shu):8 每樣本平均細(xi)胞數:2287 我們(men)的研究中(zhong),該(gai)如何設定細胞(bao)數量? 根據以上文章,我們可(ke)見,細(xi)(xi)胞總數(shu)(shu),一般都需要(yao)達到萬級甚(shen)至(zhi)十萬級。而單個樣本中(zhong)的細(xi)(xi)胞數(shu)(shu)目,都沒有超過1萬。細(xi)(xi)胞濃(nong)度(du)越高(gao)(gao),油包水結構中(zhong)捕獲(huo)到雙細(xi)(xi)胞的概率越高(gao)(gao)。如果想要(yao)細(xi)(xi)胞的分群更精確,細(xi)(xi)胞總數(shu)(shu)需要(yao)提(ti)高(gao)(gao),更推(tui)薦的方案是(shi)提(ti)高(gao)(gao)樣本數(shu)(shu)量,而不是(shi)提(ti)高(gao)(gao)細(xi)(xi)胞懸液的濃(nong)度(du)。 小伙(huo)伴們,關(guan)于細胞數量的設定策(ce)略,你是否get到了呢(ni)~