2018-07-10
miRNA在(zai)前列腺癌（PCa）進展(zhan)中(zhong)(zhong)具有重要作(zuo)用(yong)，一些(xie)miRNA已(yi)被鑒定為PCa中(zhong)(zhong)潛(qian)在(zai)的(de)癌基(ji)因或腫瘤抑制因子(zi)。本文作(zuo)者研究了miR-34家(jia)族成員miR-34b和miR-34c在(zai)不同PCa細(xi)胞系(xi)中(zhong)(zhong)的(de)表(biao)達，并(bing)討(tao)論了miR-34b在(zai)體外侵襲(xi)和遷移PCa細(xi)胞中(zhong)(zhong)的(de)分子(zi)機制。DU145和PC3細(xi)胞系(xi)之(zhi)間轉(zhuan)錄組差(cha)異分析表(biao)明miR-34b和miR-34c都靶向參與代謝的(de)關鍵途徑，例如增殖，遷移和侵襲(xi)。
RNA-seq材料：DU145和PC3細胞(bao)系(xi)
測(ce)序平(ping)臺(tai)：Illumina
測(ce)序公司(si)：上海派森諾(nuo)生物(wu)科技股(gu)份有限公司(si)
一些研(yan)究證實(shi)，DU145和PC3分別是具有(you)中(zhong)度(du)和高轉移潛能(neng)的(de)PCa細胞系(xi)，為確(que)保這兩(liang)種細胞系(xi)適(shi)合(he)用于(yu)后(hou)續實(shi)驗(yan)，作者通過對遷(qian)移和侵(qin)襲能(neng)力(li)的(de)測(ce)定來證明細胞侵(qin)入細胞外基質的(de)轉移能(neng)力(li)，結(jie)果表(biao)明DU145和PC3分別是具有(you)中(zhong)度(du)和高轉移潛能(neng)的(de)PCa細胞系(xi)（圖1）。
圖1 兩種前(qian)列腺癌細胞遷移和侵襲能(neng)力的比(bi)較
為鑒定miRNA在(zai)PCa細(xi)胞(bao)中(zhong)的(de)(de)(de)差異表達，在(zai)DU145和PC3細(xi)胞(bao)中(zhong)進(jin)行(xing)了miRNA測(ce)(ce)序分(fen)析。通過熱圖分(fen)析表明(ming)，與(yu)(yu)PC3細(xi)胞(bao)相比(bi)，DU145細(xi)胞(bao)中(zhong)miR-34b和miR-34c的(de)(de)(de)表達顯著(zhu)更高（圖2A）。使用miRNA測(ce)(ce)序（圖2B）和通過qRT-PCR（圖2C）在(zai)DU145和PC3細(xi)胞(bao)中(zhong)研究(jiu)miR-34家族的(de)(de)(de)三(san)個(ge)成員(yuan)的(de)(de)(de)表達水平。發(fa)現(xian)miR-34家族的(de)(de)(de)三(san)個(ge)成員(yuan)的(de)(de)(de)表達水平顯示出(chu)與(yu)(yu)miRNA發(fa)現(xian)的(de)(de)(de)相同(tong)的(de)(de)(de)趨勢測(ce)(ce)序，表明(ming)miR-34b和miR-34c可能(neng)參與(yu)(yu)前列腺(xian)癌(ai)轉移。且(qie)數據表明(ming)miR-34b和miR-34c的(de)(de)(de)表達水平與(yu)(yu)轉移灶(zao)呈負相關PCa的(de)(de)(de)潛力(li)。
圖(tu)2 DU145和(he)PC3中miR-34a，miR-34b和(he)miR-34c的表達水平(ping)
緊接著作(zuo)者進(jin)行了一系列的(de)實(shi)(shi)驗(yan)來說明(ming)(ming)(ming)miR-34b和(he)miR-34c的(de)功(gong)能(neng)。細胞增殖和(he)生(sheng)長實(shi)(shi)驗(yan)結果證(zheng)明(ming)(ming)(ming)miR-34b和(he)miR-34c抑制PCa細胞增殖。遷移(yi)(yi)和(he)侵襲實(shi)(shi)驗(yan)結果表明(ming)(ming)(ming)miR-34b和(he)miR-34c的(de)過(guo)表達降低了較高轉移(yi)(yi)性PC3細胞的(de)遷移(yi)(yi)和(he)侵襲能(neng)力(li)。
圖3 miR-34b和miR-34c均抑制PCa細胞增殖(zhi)
小RNA測(ce)序(xu)結(jie)(jie)果中靶基(ji)因的KEGG富集分析顯(xian)(xian)示，miR-34b的靶基(ji)因中涉及(ji)的主要信(xin)(xin)號(hao)傳(chuan)導(dao)途(tu)徑包括：TGF-β信(xin)(xin)號(hao)傳(chuan)導(dao)途(tu)徑，軸突導(dao)向途(tu)徑，肌動蛋白細(xi)胞(bao)(bao)骨(gu)架調控(kong)途(tu)徑，MAPK信(xin)(xin)號(hao)通(tong)路等(deng)（圖4）。在(zai)本(ben)文中作(zuo)者關(guan)(guan)注TGF-β信(xin)(xin)號(hao)通(tong)路。用miR-34b / c模(mo)擬物和模(mo)擬NC轉染(ran)PC3細(xi)胞(bao)(bao)，結(jie)(jie)果表明miR-34b在(zai)轉錄水平上不調節TGF-β信(xin)(xin)號(hao)傳(chuan)導(dao)途(tu)徑，但(dan)在(zai)蛋白質(zhi)水平上顯(xian)(xian)著抑制TGF-β。本(ben)文證明了TGF-β信(xin)(xin)號(hao)通(tong)路可能是miR-34b調節PCa細(xi)胞(bao)(bao)遷移和侵(qin)襲的關(guan)(guan)鍵靶點。
圖(tu)4 KEGG富集(ji)分析(xi)表明(ming)miR-34b在前列腺(xian)癌細胞中的作用途徑
參考(kao)文(wen)獻：
LL Fang et al. ?Int J Mol Sci (2017)
Potent Inhibition of miR-34b on Migration and Invasion in Metastatic Prostate Cancer Cells by Regulating the TGF-β Pathway.
影響因子：3.687
轉(zhuan)錄(lu)組調控事業部 王慧(hui)敏
2018年7月10
