2025-08-01
研究背景
微波(bo)消融(rong)（MWA)是一種微創(chuang)的(de)(de)腫瘤(liu)(liu)治療技術，它(ta)利用微波(bo)產生的(de)(de)熱能(neng)來直接摧毀腫瘤(liu)(liu)組織。研究表明，微波(bo)消融(rong)可以激發全身免疫反(fan)應以控(kong)制轉移(yi)或(huo)殘留腫瘤(liu)(liu)，即遠(yuan)隔效應。然而，消融(rong)介導(dao)的(de)(de)遠(yuan)隔效應較弱，難以持續殺傷腫瘤(liu)(liu)。
既往研究發現，微波消融聯合嵌合抗原受體（CAR）T細胞可以有效抑制遠隔腫瘤，但是該聯合療法僅對靶抗原均質腫瘤有較好療效，難以殺傷抗原異質性腫瘤。針對這一難題，廣州醫科大學附屬第二醫院廣州朱康順教授團隊構建可分泌SIRPα（CV1）的sCAR-T細胞，驗證了其在聯合微波消融時可增強對遠隔抗原異質性腫瘤的遠隔效應，并揭秘其增強機制。派森諾生物為該研究提供了單細胞 RNA 測序（scRNA-seq）分析服務。
論文題目：CV1-secreting sCAR-T cells potentiate the abscopal effect of microwave ablation in heterogeneous tumors
影響因子：10.6
研究思路
研究結果
1、sCAR-T細胞能增強MWA的遠隔效應，使控制遠處抗原異質性腫瘤成為可能
作(zuo)者構(gou)建了多(duo)種腫瘤治療(liao)方案(an)小鼠模型，包(bao)括(kuo)GPC3-msCART（可靶向chGPC3并分泌CV1）、GPC3-mCART靶向chGPC3等。與其它治療(liao)方案(an)相比，MAmsCART在消(xiao)融(rong)(rong)腫瘤方面表(biao)現更優。MAmsCART治療(liao)顯著(zhu)抑制(zhi)了未消(xiao)融(rong)(rong)腫瘤，而MACART治療(liao)組(zu)僅獲得(de)中度的非(fei)消(xiao)融(rong)(rong)性腫瘤抑制(zhi)效果。這提示在采用MACART治療(liao)時，除了sCAR-T細胞外，其他內源性免(mian)疫細胞在控(kong)制(zhi)腫瘤方面也發揮著(zhu)重要作(zuo)用。
2、利用scRNA-seq技術在異質性腫瘤聯合治療中鑒定腫瘤浸潤免疫細胞
對(dui)非(fei)消(xiao)融PDX腫(zhong)(zhong)瘤(liu)中MACART和(he)MAsCART腫(zhong)(zhong)瘤(liu)團塊中的(de)CD45免疫細(xi)(xi)(xi)胞(bao)進行了(le)分選，使用(yong)單細(xi)(xi)(xi)胞(bao)RNA測序（scRNA-seq）分析。 scRNA-seq分析顯示，兩治療組之間(jian)上(shang)述細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)總數(shu)沒有顯著差異。然而，與(yu)MACART相比，MAsCART中M1巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)比例有增加的(de)趨(qu)勢。這些觀察結(jie)果提(ti)供了(le)一個可能(neng)，即MWA和(he)CAR-T細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)抗(kang)腫(zhong)(zhong)瘤(liu)作用(yong)可能(neng)與(yu)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)有關。
3、在MAsCART治療后，巨噬細胞而非內源性T細胞在異質腫瘤中的遠隔效應中起關鍵作用
接(jie)著作者發現CD8T細(xi)(xi)(xi)胞(bao)淋巴(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)耗竭(jie)并不(bu)能阻(zu)止MAmsCART治(zhi)療(liao)在具有(you)異(yi)(yi)質性(xing)腫(zhong)瘤(liu)的(de)(de)(de)小鼠中刺激遠(yuan)(yuan)處(chu)(chu)效(xiao)應(ying)。并通過實(shi)驗進一步驗證(zheng)了MAmsCART組中觀(guan)察(cha)到的(de)(de)(de)遠(yuan)(yuan)處(chu)(chu)效(xiao)應(ying)至少不(bu)是(shi)(shi)主要依賴于宿主T細(xi)(xi)(xi)胞(bao)對(dui)(dui)遠(yuan)(yuan)處(chu)(chu)腫(zhong)瘤(liu)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)毒性(xing)。與MACART組相比，MAmsCART組具有(you)炎癥(zheng)特(te)征的(de)(de)(de)巨噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)（CD68、C1QA、CCL3、CCL4和(he)CXCL2）數量增加。表(biao)達這(zhe)些炎癥(zheng)標志物的(de)(de)(de)巨噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)與更好(hao)(hao)的(de)(de)(de)抗腫(zhong)瘤(liu)特(te)性(xing)有(you)關(guan)，從而確保了與MAmsCART治(zhi)療(liao)相關(guan)的(de)(de)(de)更好(hao)(hao)的(de)(de)(de)遠(yuan)(yuan)處(chu)(chu)效(xiao)應(ying)。這(zhe)些觀(guan)察(cha)結(jie)果表(biao)明，MAmsCART治(zhi)療(liao)的(de)(de)(de)遠(yuan)(yuan)處(chu)(chu)效(xiao)應(ying)是(shi)(shi)由巨噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)對(dui)(dui)具有(you)抗原異(yi)(yi)質性(xing)的(de)(de)(de)癌細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)吞(tun)噬能力(li)介導的(de)(de)(de)。
4、消融的腫瘤增強趨化因子的產生對于招募引發遠端效應的巨噬細胞至關重要
相對(dui)(dui)于(yu)對(dui)(dui)照組(zu)，在(zai)單獨MWA治(zhi)療或(huo)MWA聯合(he)治(zhi)療中均觀(guan)察到(dao)未(wei)消(xiao)融(rong)腫(zhong)(zhong)(zhong)瘤中巨(ju)噬細胞(bao)的浸潤增(zeng)加。對(dui)(dui)水浴SK-HEP-1-GPC3細胞(bao)的bulk RNA-seq、ELISA數(shu)據進行分析后發現(xian)，可招(zhao)募巨(ju)噬細胞(bao)的幾種趨化因子(zi)升高，包括CSF1、CCL26、CXCL8等。鑒(jian)于(yu)已有(you)研究(jiu)表(biao)明癌(ai)細胞(bao)分泌的CSF1能招(zhao)募巨(ju)噬細胞(bao)到(dao)腫(zhong)(zhong)(zhong)瘤中，作者(zhe)進一(yi)步調查了CSF1是否與(yu)遠隔效應(ying)有(you)關。研究(jiu)發現(xian)，當(dang)消(xiao)融(rong)細胞(bao)進行Csf1基因敲除時，募集到(dao)未(wei)消(xiao)融(rong)位點的巨(ju)噬細胞(bao)數(shu)量減少。這些數(shu)據表(biao)明，HCC細胞(bao)在(zai)消(xiao)融(rong)腫(zhong)(zhong)(zhong)瘤部位分泌CSF1有(you)助于(yu)巨(ju)噬細胞(bao)遷移(yi)至未(wei)消(xiao)融(rong)腫(zhong)(zhong)(zhong)瘤部位，從而誘導遠隔效應(ying)。
5、sCAR-T細胞分泌CV1克服M2巨噬細胞免疫抑制，在異質腫瘤的消融效應中發揮關鍵作用
MAsCART在未消融腫(zhong)瘤(liu)(liu)中(zhong)(zhong)誘(you)導的(de)遠隔效應優于MACART，這(zhe)引發(fa)了這(zhe)樣(yang)一個問題：CD47-SIRPa軸的(de)阻斷劑(ji)CV1是(shi)(shi)否通過增強巨噬細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)吞(tun)噬作用以驅(qu)動(dong)遠隔效應？相(xiang)比之下，含(han)有GPC3-msCART上清(qing)液(ye)的(de)共(gong)培養(yang)物中(zhong)(zhong)干擾素（IFN）-g的(de)分泌(mi)(mi)量(liang)明(ming)顯更高(gao)。這(zhe)表明(ming)，GPC3-msCART細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)可以逆轉(zhuan)M2巨噬細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)功能性免疫抑制(zhi)，促(cu)進(jin)免疫激活和(he)(he)腫(zhong)瘤(liu)(liu)裂解。這(zhe)些數據支持(chi)這(zhe)樣(yang)的(de)假設，即腫(zhong)瘤(liu)(liu)中(zhong)(zhong)局部msCAR-T細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)增殖和(he)(he)激活后(hou)，腫(zhong)瘤(liu)(liu)內(nei)可能會出現更高(gao)的(de)CV1濃度。KEGG分析顯示(shi)，MAsCART組中(zhong)(zhong)吞(tun)噬體基因(yin)相(xiang)對于MACART組富集。更重(zhong)要的(de)是(shi)(shi)，這(zhe)種(zhong)體外效應并沒有伴隨著(zhu)外周血紅細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)(he)免疫細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)或(huo)血清(qing)生化物質的(de)明(ming)顯變(bian)化。這(zhe)些數據證明(ming)了msCAR-T細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)改善吞(tun)噬免疫抑制(zhi)的(de)能力，很(hen)可能是(shi)(shi)通過CV1的(de)分泌(mi)(mi)來實現的(de)。
6、MAsCART誘導的體外效應也適用于其他異質實體瘤
MWA不僅常(chang)用(yong)于(yu)HCC患者(zhe)，還用(yong)于(yu)肺癌(ai)、胰腺癌(ai)和乳腺癌(ai)患者(zhe)以及其他10種實(shi)(shi)體腫瘤患者(zhe)。作者(zhe)在NOG小鼠的(de)(de)幾種異種移植模型(xing)中(zhong)觀察(cha)到(dao)了(le)(le)巨噬(shi)細胞依賴的(de)(de)遠隔效(xiao)應(ying)。此(ci)外，為(wei)了(le)(le)密切模擬臨(lin)床(chuang)患者(zhe)中(zhong)實(shi)(shi)體腫瘤的(de)(de)異質性，作者(zhe)建立了(le)(le)肺癌(ai)和乳腺癌(ai)的(de)(de)患者(zhe)源性異種移植PDX模型(xing)。在這(zhe)些PDX模型(xing)中(zhong)觀察(cha)到(dao)了(le)(le)遠隔效(xiao)應(ying)，以及巨噬(shi)細胞向未消融(rong)(rong)腫瘤部位的(de)(de)募集，這(zhe)表明(ming)消融(rong)(rong)誘(you)導的(de)(de)遠位反應(ying)可能不僅限于(yu)HCC，也可能存(cun)在于(yu)需要MWA治療的(de)(de)其他原發性或轉(zhuan)移性腫瘤中(zhong)。這(zhe)些結果突出了(le)(le)MWA聯(lian)合CAR-T治療方案的(de)(de)臨(lin)床(chuang)轉(zhuan)化價(jia)值。
小 結
該(gai)研究創新性聚焦(jiao)于未接受(shou)消(xiao)融治療的(de)(de)遠端(duan)腫瘤(liu)免疫微環境，首次提出 “sCAR-T 細胞療法與 MWA 聯合應用以(yi)強化遠隔(ge)效應” 的(de)(de)治療方案。該(gai)策略通(tong)過特異性阻斷(duan) “別吃(chi)我” 信號通(tong)路中 CD47 與 SIRPα 的(de)(de)相互作用，形成對肝(gan)癌 “精(jing)準靶向攻擊 + 全域協同清(qing)除” 的(de)(de)多層次治療體系，為提升肝(gan)癌 MWA 治療效果、降(jiang)低術后(hou)復發轉(zhuan)移風險開辟了新的(de)(de)解決路徑。
