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豬腸道微生物組研究,登陸《Molecular Nutrition & Food Research》

2017-09-20

 


文章背景


最近(jin),派森(sen)諾生物與四川農業大(da)學(xue)合作,在《Molecular Nutrition & Food Research》(影響因子:4.3229)上發表文章,揭示豬腸道菌群對不同的(de)非淀粉(fen)多糖組分飲食的(de)適應性(xing)。


研究(jiu)背景


膳食(shi)(shi)纖維(wei)(wei)(wei)(wei)提取自植物(wu),能(neng)抗人(ren)體小(xiao)腸(chang)消化吸(xi)收,在大腸(chang)中能(neng)部分(fen)或全部發(fa)酵,包括多糖、寡糖、木質素以及相(xiang)關(guan)的(de)(de)(de)(de)植物(wu)物(wu)質。富含纖維(wei)(wei)(wei)(wei)的(de)(de)(de)(de)飲食(shi)(shi),具有(you)預防(fang)便秘、憩室癥和(he)心血管疾病(bing)等作(zuo)用(yong)(yong);且(qie)可以調節腸(chang)道蠕動,產生(sheng)短鏈脂肪酸(SCFAs),刺激腸(chang)黏膜生(sheng)長。纖維(wei)(wei)(wei)(wei)化學(xue)結構多樣(yang),制約著(zhu)腸(chang)道菌群對(dui)它(ta)們(men)的(de)(de)(de)(de)利用(yong)(yong),不同的(de)(de)(de)(de)細菌因(yin)代(dai)謝特性的(de)(de)(de)(de)差異,對(dui)于(yu)纖維(wei)(wei)(wei)(wei)組分(fen)的(de)(de)(de)(de)消化能(neng)力也各有(you)所長。因(yin)此,膳食(shi)(shi)纖維(wei)(wei)(wei)(wei)在調節腸(chang)道微生(sheng)物(wu)組成方面起著(zhu)至(zhi)關(guan)重要的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong),深(shen)入了解它(ta)們(men)的(de)(de)(de)(de)相(xiang)互作(zuo)用(yong)(yong),對(dui)于(yu)維(wei)(wei)(wei)(wei)持(chi)、改善腸(chang)道菌群以及宿(su)主(zhu)健康非常(chang)重要。


研究目的(de)


研究報(bao)道(dao)(dao)非淀粉多(duo)糖(Nonstarch polysaccharides,NSPs)的(de)膳食纖維會影響(xiang)腸(chang)道(dao)(dao)微生物(wu)(wu)的(de)群落多(duo)樣性和(he)組(zu)(zu)成(cheng)結構。然而,對(dui)于單(dan)一纖維組(zu)(zu)分的(de)作用鮮有報(bao)道(dao)(dao)。本文以豬作為(wei)動物(wu)(wu)模型,描述了腸(chang)道(dao)(dao)微生物(wu)(wu)組(zu)(zu)對(dui)不同纖維組(zu)(zu)分的(de)應答。


研究方法(fa)


測序(xu)技術:Illumina MiSeq高通(tong)量測序(xu)平臺(tai)

測序模式(shi):微生物組細菌16S rRNA V4區(qu)

實驗對象:豬Ileal(回腸)和Cecal(盲(mang)腸)中部消化物

實驗設計:32頭(tou)雜(za)食豬(平均體重6.55 ± 0.14 kg)隨機分為(wei)4組;其中(zhong):

(A)無纖維飲食組(FFD):8頭;

(B)含NSPs纖(xian)維飲(yin)食組:5%纖(xian)維素(CEL)、木聚糖(XYL)或(huo)b-葡聚糖(GLU)飲(yin)食組各8頭

實(shi)驗處(chu)(chu)理:按(an)2012年國(guo)家(jia)研究委員會的營(ying)養建議制定膳食(shi),實(shi)驗期間可自由覓食(shi)和(he)補水。喂養28天后(hou),經靜脈注射戊(wu)巴比妥鈉使(shi)豬(zhu)(zhu)處(chu)(chu)于深度麻(ma)醉(zui),隨(sui)后(hou)殺豬(zhu)(zhu)放血,取出腸(chang)道組織,立即記錄各腸(chang)段的重量(liang)和(he)長度。并取盲腸(chang)和(he)回腸(chang)中部約(yue)4g的消(xiao)化物于無菌(jun)管中,-80°C速凍,留待測定短鏈脂肪酸(SCFA)的濃度和(he)菌(jun)群(qun)組成。


研究結(jie)果


NSPs對斷奶仔豬生(sheng)長性能和腸(chang)道生(sheng)長的(de)(de)影(ying)響(xiang)研究中,豬飼料添加(jia)(jia)5%的(de)(de)NSPs對腸(chang)道發育有明顯(xian)的(de)(de)影(ying)響(xiang);CEL組小腸(chang)和大腸(chang)的(de)(de)濕(shi)重高,且大腸(chang)長度(du)有所增加(jia)(jia)。添加(jia)(jia)5%的(de)(de)XYL會(hui)大大減少(shao)腸(chang)道的(de)(de)總(zong)重量和長度(du),但是會(hui)顯(xian)著增加(jia)(jia)十二(er)指(zhi)腸(chang)的(de)(de)絨(rong)毛長度(du)。




攝(she)入NSPs后(hou),對(dui)消化的代謝產(chan)物和pH值進行(xing)測定(ding),發現回腸中短鏈脂肪酸,尤其(qi)是(shi)丙(bing)酸鹽和丁(ding)酸鹽的含(han)量極

低,但乙酸(suan)(suan)鹽(yan)的濃(nong)度顯(xian)著提(ti)高;且回(hui)腸(chang)的pH值傾向于(yu)增加。而盲(mang)腸(chang)中,XYL組乙酸(suan)(suan)、丙(bing)酸(suan)(suan)和丁酸(suan)(suan)濃(nong)度低于(yu)其他組,GLU組SCFA濃(nong)度高,但pH值低。


 

定量PCR分(fen)析回(hui)腸(A)和盲(mang)腸(B)的16S rRNA基(ji)(ji)因拷貝數,整(zheng)體上盲(mang)腸樣本的平均拷貝數高(gao)于(yu)(yu)回(hui)腸樣本。相對于(yu)(yu)FDD組(zu),攝食NSPs導致豬(zhu)腸道16S rRNA基(ji)(ji)因拷貝數顯著增加(jia)。其中,CEL組(zu)在回(hui)腸中增量顯著高(gao)于(yu)(yu)其他組(zu),盲(mang)腸中NSPs各組(zu)拷貝數的增加(jia)幅(fu)度相似。