將(jiang)提取的總RNA進(jin)行反(fan)轉錄,合成cDNA并加接頭序列(lie),然后將(jiang)cDNA進(jin)行環化處理(li),并上(shang)機測序。
Pacbio 測序實驗(yan)流(liu)程:
1)高質量總RNA的制備;
2)SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit (Clontech) 反轉(zhuan)錄,將 RNA 反轉(zhuan)錄成 cDNA;
3)文庫構建:SMRTbell? Template Prep Kit 1.0;
4)上機測序(xu):Sequel? Sequencing Kit 2.0。
將提取的總RNA進行(xing)反轉錄(lu),合(he)成(cheng)cDNA并加接頭序列,然后將cDNA進行(xing)環化處理,并上機測序。
Pacbio 測序實驗流程:
1)總RNA的制備;
2)SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit (Clontech) 反(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu),將 RNA 反(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)成 cDNA;
3)文庫構建(jian):SMRTbell? Template Prep Kit 1.0;
4)上機測序:Sequel? Sequencing Kit 2.0。